Особенности состава клеточной стенки туберкулезных бактерий. Факторы патогенности туберкулезной палочки. L-формы микобактерий туберкулеза

Морфология Mycobacterium tuberculosis(красные палочки) в мокроте. Окраска по Цилю-Нильсену. Грамположительные тонкие прямые или слегка изогнутые палочки; - Клеточная стенка содержит большое количество восков и липидов (миколовую кислоту), что обусловливает гидрофобность, устойчивость к кислотам, щелочам, спиртам; - Окрашивается по Цилю- Нильсену; - Неподвижны, спор и капсул не образует; - Возможен переход в фильтрующиеся и L-формы

Культуральные свойства Аэробы; Растут на средах, содержащих яйца, глицерин, картофель, аспарагин, витамины, соли; Чаще всего применяют яичную среду Левенштейна-Йенсена и синтетическую среду Сотона; растут медленно (рост обнаруживается через 2-3 недели и позднее); Колонии сухие, морщинистые, сероватые; Обладают биохимической активностью, позволяющей дифференцировать виды Основной тест – ниациновая проба (накопление в жидкой среде никотиновой кислоты Среда Левенштейна-Йенсена и рост микобактерий.

Факторы патогенности Фактор адгезии - корд – фактор = сложный эфир трегаллозы и двухостатков миколовой кислоты; Антифагоцитарные факторы – воска (особенно воск Д),сульфаты и некоторые другие соединения, препятствующие слиянию фаго- и лизосомы; Сульфолипиды подавляют активностьлизосомальных ферментов; Фосатидная и восковая фракции липидов вызывают сенсибилизацию организма; Ацетон-растворимые липиды усиливают иммуносупрессивные свойства микобактерий и модифицируют мемраны клетки хозяина; Липиды обеспечивают устойчивость к комплементу, свободным радикалам фагоцитов Основной фактор –туберкулин – обладает токсическими и аллергическими свойствами

Взаимодействие Mycobacterium tuberculosis с организмом человека начинается при попадании возбудителя в легкиеMycobacterium tuberculosis После адгезии с помощью корд-фактора захватываются альвеолярными макрофагами; События, которые происходят дальше (макрофаги либо сдерживают размножение микобактерий, либо нет), определяются соотношением между бактерицидной активностью макрофагов и вирулентностью микобактерий. После размножения внутри макрофага микобактерии его разрушают Моноциты, выходящие из кровотока под влиянием факторов хемотаксиса, захватывают освобождаемые из разрушенных макрофагов микобактерий Макрофаги переносят микобактерии в ближайшие лимфоузлы, где они долго сохраняются в виду незавершенного фагоцитоза Таким образом, первоначальное попадание возбудителя в легкие или другие органы вызывает развитие малого или неспецифического воспаления с макрофагальной инфильтрацией

Патогенез (продолжение) Через 2-4 нед после заражения начинается следующий этап взаимодействия микобактерий с макроорганизмом. При этом наблюдаются два процесса - реакция повреждения ткани по типу ГЗТ(специфическая воспалительная реакция) и реакция активации макрофагов. С развитием иммунитета и накоплением в первичном очаге большого количества активированных макрофагов формируется туберкулезная гранулема.гранулема Гранулемы состоят из лимфоцитов и активированных макрофагов, то есть эпителиоидных и гигантских клеток.эпителиоидныхгигантских клеток Развитие реакции повреждения ткани приводит к образованию в центре гранулемы очага казеозного некроза В случае заживления очага некротические массы уплотняются, обызвествляются в результате отложения солей кальция, вокруг очага формируется соединительно-тканная капсула – очаг Гона НО микобактерии в виде L-форм сохраняют в таком очаге жизнеспособность долгие годы При снижении резистентности макроорганизма происходит активация очага с развитием вторичного туберкулеза

Иммунитет Противотуберкулезный иммунитет формируется в ответ на проникновение в организм микобактерий в процессе инфекции или после вакцинации и носит нестерильный, инфекционный характер, что обусловлено длительной персистенцией L-форм Решающая роль принадлежит клеточному иммунитету Исход заболевания определяется активностью Т-хелперов, которые активируют фагоцитарную активность макрофагов и активность Т-киллеров

Эпидемиология Основной источник инфекции – больной туберкулезом органов дыхания Пути передачи – воздушно-капельный, реже алиментарный, контактный микобактерий туберкулеза очень устойчивы во внешней среде. В проточной воде они могут сохранять жизнеспособность до 1 года, в почве и навозе 6 мес., на различных предметах до 3 мес., в библиотечной пыли 18 мес., в высушенном гное и мокроте до 10мес. При кипячении палочка Коха погибает через 5 мин, в желудочном соке через 6ч, при пастеризации через 30мин прямой солнечный свет убивает микобактерии в течение полутора часов, а ультрафиолетовые лучи за 2-3 минуты. Дезинфектанты, содержащие хлор, убивают микобактерии в течение 5 часов.

Эпидемиология (продолжение) Туберкулез распространен повсеместно Росту заболеваемости способствуют социально- экономические факторы (основной фактор – голодание) С 1990 года во всем мире регистрируется резкий подъем заболеваемости Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) и синдром приобретенного иммунодефицита вызвали заметное увеличение числа случаев туберкулеза в некоторых странах С другой стороны, проблема заключается в распространении микобактерий с множественной лекарственной устойчивостью

Лечение В настоящее время по степени эффективности противотуберкулезные препараты делятся на 3 группы: Группа А – изониазид, рифампицин и их производные (рифабутин, рифатер) Группа В – стрептомицин, канамицин, этионамид, циклосерин, фторхинолоны и др. Группа С – ПАСК и тиоацетозон

Вакцина БЦЖ (BCG – бацилла Кальметта и Герена) – содержит живые авирулентные микобактерии, полученные из M.bovis путем многолетних пассажей на средах, содержащих желчь Поствакцинальный иммунитет связан с формированием ГЗТ (гиперчувствительности замедленного типа) Специфическая п рофилактика

Лабораторная диагностика Клинический материал: гной, мокрота, кровь, бронхиальный экссудат, спиномозговая жидкость, плевральная жидкость,моча и др. Методы: 1.Бактериоскопический: прямая окраска мазка мокроты по методу Циля-Нильсена или мазка после обогащения (концентрирования методами флотации или гомогенизации)

Лабораторная диагностика 4.Бактериологический (культуральный) метод используется для проверки эффективности лечения (2-8 недель необходимы для роста колоний на среде Левенштейна-Йенсена и еще некоторое время для оценки эффекта препаратов, вводимых в среду роста); 5.Серологический метод (РСК, ИФА, радиоиммунный и др.); 6.Биологический метод (заражение морских свинок и кролика с последующим выделением чистой культуры возбудителя); 7.Туберкулиновая проба Манту (см.далее); 8.Молекулярно-генетический метод (ПЦР)

Кожно-аллергическая проба Манту Внутрикожное введение высокоочищенного туберкулина (PPD= Purified Protein Derivative) вызывает у инфицированных микобактериями людей местную воспалительную реакцию в виде инфильтрата и покраснения (реакция ГЗТ). Неинфицированные люди никакой реакции на введение туберкулина не дают. Эту пробу применяют для выявления инфицированных, сенсибилизированных людей.

По патогенности для человека и для отдельных видов микобактерии делятся на 2 группы. Первая группа - собственно патогенные микобактерии туберкулеза, среди которых выделяют три вида. Вторая группа - атипичные микобактерии, среди которых есть сапрофиты - не патогенные для людей и животных и условно патогенные микобактерии - при некоторых условиях могут вызвать микобактериоз, который напоминает туберкулез.

Атипичные микобактерии

По одной из классификаций они разделены на четыре группы (в зависимости от скорости роста и пигментообразования).

I группа - фотохромогенные микобактерии - образуют лимонно-желтый пигмент во время экспозиции культуры на свете, колонии вырастают в течение 2-3 недель. Источником инфекции могут быть крупный рогатый скот, молоко и другие молочные продукты.
II группа - скотохромогенные микобактерии, которые образуют оранжево-желтый пигмент в темноте. Распространены в воде и в почве.
III группа - нефотохромогенные микобактерии. Культуры слабопигментированные или непигментированные, видимый рост оказывается уже через 5-10 суток. Различные по вирулентности и оптимальной температурой роста. Случаются в почве, в воде, в различных животных (свиней, овец).
IV группа - микобактерии, которые быстро растут на питательных средах. Рост дают через 2-5 дней.

Атипичные микобактерии определяются в 0,3-3% культур, чаще вследствие загрязнения среды. Этиологическая роль их считается доказанной, если из патологического материала они высеваются повторно и их рост характеризуется большим количеством колоний, а других возбудителей заболевания нет.

Заболевание, вызванное атипичными штаммами микобактерий туберкулеза, называют микобактериозом. Из штаммов атипичных микобактерий получен продукт их жизнедеятельности - сенситин. При внутрикожном введении сенситина у больных микобактериозом возникает положительная реакция. По клиническому течению микобактериоз напоминает туберкулез, иногда сопровождается кровохарканьем, быстро прогрессирует.

Микробиология Возбудитель туберкулза

М. tuberculosis (палочка Коха ) - тонкая, прямая или слегка изогнутая палочка, размером 1-10*0,2-0,6 мкм, со слегка закруглёнными концами (рис. 22-1). В молодых культурах палочки более длинные, а в старых склонны к ветвлению.

Бактерии туберкулёза способны образовывать L-формы, сохраняющие способность к инфицированию, а также фильтрующиеся формы, патогенетическая роль которых остаётся плохо изученной. Капсул не имеют, но образуют микрокапсулу.

Методом Циля-Нильсена окрашиваются в ярко-красный цвет. Содержат кислотонеустойчивые гранулы (зёрна Муха), располагающиеся в цитоплазме.

Культуральные свойства возбудителя туберкулеза

Туберкулёзные палочки могут расти как в аэробных, так и факультативно анаэробных условиях. Повышенное содержание СО 2 (5-10%) способствует более быстрому росту. Оптимальная температура 37-38 °С; рН 7,0-7,2. Нуждаются в присутствии белков, глицерина, факторов роста (биотин, никотиновая кислота, рибофлавин и др.), ионов (Mg2+ K+, Na+ Fe2+) и др.

Для выращивания бактерий туберкулеза наиболее часто применяются глицериновые, картофельные с жёлчью, яичные, полусинтетические и синтетические среды. Наиболее оптимальна среда Лёвенштайна-Йёнсена.

На средах туберкулёзные палочки обычно образуют R-колонии; под влиянием антибактериальных препаратов бактерии могут диссоциировать с образованием мягких и влажных S-колоний.

В жидких средах палочки туберкулеза образуют сухую морщинистую пленку (на 7-10-е сутки), поднимающуюся на края пробирки; среда остаётся прозрачной. В жидких средах выявляют корд-фактор - важный дифференциальный признак вирулентности. Наличие корд-фактора обусловливает сближение бактериальных клеток в микроколониях и их рост в виде серпантинообразных кос.

На плотных средах рост палочек туберкулеза отмечают на 14-40-е сутки в виде сухого морщинистого налёта желто-, вато-кремового цвета. Зрелые колонии напоминают цветную капусту, крошковатые, плохо смачиваются водой и имеют приятный запах. Культуры плохо снимаются со среды, а при прокаливании трещат. Отличительная особенность М. tuberculosis- способность к синтезу значительного количества никотиновой кислоты (ниацина); ниациновый тест - важный метод дифференцировки микобактерий.

Устойчивость возбудителя туберкулеза во внешней среде

Возбудитель туберкулеза устойчив к воздействию факторов окружающей среды. На страницах книги микобактерии сохраняются в течение 2-3 мес, в уличной пыли - около 2 недель, в сыре и масле - от 200 до 250 дней, в сыром молоке - 18 дней (скисания молока не вызывает гибели микобактерий), в комнате с рассеянным дневным светом - 1- 5 мес., а в сырых подвальных помещениях и в помойных ямах - до 6 мес.

Оптимальной температурой роста возбудителя является 37-38 ° С, при температуре 42-43 ° С и ниже за 22 ° С рост и размножение его прекращаются. Для птичьего вида микобактерий туберкулеза оптимальной температурой роста является 42 ° С. При температуре 50 ° С микобактерии туберкулеза погибают через 12 ч., 70 ° С - через 1 минуту. В белковой среде их устойчивость значительно повышается. Так, микобактерии туберкулеза в молоке выдерживают температуру 55 ° С в течение 4 ч., 60 ° С - 1 час., 70 ° С - 30 мин., 90 95 ° С - от 3 до 5 минут.

Особенно возрастает устойчивость микобактерий туберкулеза в высохшей мокроте. Чтоб обезвредить жидкое мокроты, их нужно кипятить в течение 5 мин. В высохшей мокроте микобактерии туберкулеза погибают при 100 ° С через 45 минут. В тонком слое жидкой мокроты под влиянием ультрафиолетовых лучей микобактерии туберкулеза погибают через 2-3 мин., а в высохшей мокроте и в темном месте они могут сохранять жизнеспособность в течение 6-12 мес. Однако под воздействием прямого или рассеянного солнечного излучения в течение 4 часов высохшие мокроты теряет свойство вызвать заражение животных туберкулезом. В высохшей на солнце мокроте микобактерии туберкулеза не определяются.

Если мокрота попадает в сточные воды или на поля орошения, микобактерии туберкулеза сохраняют свою вирулентность более 30 дней. На расстоянии 100 м от места сброса сточных вод с противотуберкулезного санатория микобактерии туберкулеза обнаружить не пришлось.

Как избежать контакта с микобактериями

Сразу стоит отметить, что в нашей стране практически невозможно не столкнуться с патогенными микроорганизмами, вызывающими туберкулез.

Именно поэтому прививают от туберкулеза грудничков сразу после рождения, чтобы уменьшить риски контакта с микобактериями.

Грудное молоко, вовремя проведенные вакцинации против туберкулеза, ежегодная проба Манту для детей, - этого не всегда достаточно, чтобы предотвратить заражения. Какие меры еще необходимы?

Как ни странно, но противотуберкулезными или профилактическими мероприятиями можно считать привитие у детей любви к спорту, здоровому образу жизни, правильное полноценное питание согласно возрастных особенностей, закаливание, проветривание помещений и влажная уборка в общественных местах и проч.

Так выглядят основные факторы, которые способствуют снижению иммунитета и увеличивают возможность заразиться туберкулезом:

неполноценное питание (недостаток белковой пищи в рационе);
наличие хронических заболеваний, таких как алкоголизм, наркомания, сахарный диабет и проч.;
психические травмы;
пожилой возраст и проч.

Можно сказать, что туберкулез – это не просто сложная болезнь, но и социальное явление, которое, по сути, является своеобразным индикатором того, насколько хорошо живет население той или иной страны, как организовано лечение и профилактика заболевания.

Нельзя наверняка сказать, заразиться туберкулезом человек или нет, если у него нет постоянного контакта с больным.

Многое здесь также зависит от состояния иммунной системы, образа жизни, типа микобактерий и наличия среды, в которой будет находиться микроб.

Многие люди годами являются носителями инфекции, и при этом, не болеют сами. Ослабленному же организму иногда достаточно одного контакта с больным человеком, чтобы заразиться.

Поэтому старайтесь избегать общения с зараженными людьми, ведите активный образ жизни и чаще проветривайте помещения.

Патогенез

Возбудитель
туберкулеза проникает в организм в
составе мелкодисперсных аэрозолей.
Возбудитель должен попасть в альвеолы,
где они поглощаются резидентными
макрофагами, взаимоотношение с которыми
и определяет дальнейшее развитие
инфекции. Туберкулез относится к
классическим внутримакрофагальным
инфекциям.

Внутри
макрофагов туберкулезные бактерии
оказываются устойчивыми к бактерицидным
факторам фагоцитов благодаря мощной
липидной оболочке. В результате
взаимодействия микобактерий и макрофагов
под влиянием факторов вирулентности
развивается воспаление гранулематозного
типа.

Гранулема
развивается сразу после инфицирования,
но в дальнейшем она получает мощный
импульс к развитию, когда в организме
появляются Т-лимфоциты, сенсибилизированные
к возбудителю.

Доиммунная
гранулема через 2–3 недели под влиянием
Т-лимфоцитов превращается в специфическую
(постиммунную), которая называется
туберкуломой.

Из
легких туберкулезная палочка попадает
в регионарные лимфатические узлы, далее
– в кровоток. Дальнейшие события связаны
со специфическим воспалением, в основе
которого лежит аллергическая реакция
на бактериальные антигены.

Путь
заражения воздушно-капельный. Источник
– больной человек, который в острый
период выделяет с мокротой туберкулезные
палочки.

Наиболее
часто встречается туберкулез легких,
но могут поражаться и кишечник, и
опорно-двигательный аппарат, и мочеполовая
система, и др.

Выделяют
два патогенетических варианта туберкулеза.

1. Первичный
туберкулез. Возникает у лиц, ранее не
имевших контакта с возбудителем.
Инфицирование происходит в детском
возрасте или подростковом периоде.
Развивается без аллергии к возбудителю.
В зоне внедрения возбудитель захватывается
макрофагами, развивается неспецифическая
гранулематозная реакция. Бактерии легко
проходят этот барьер, быстро проникают
в регионарные лимфатические узлы, кровь
и различные органы.

Через
2–3 недели формируется первичный
туберкулезный комплекс, включающий в
себя:

1) первичный
аффект – очаг в легочной ткани;

2) лимфаденит
– воспаление регионарных лимфоузлов;

3) лимфангит
– воспаление лимфатических сосудов.

Наиболее
часто он самоизлечивается, подвергается
фиброзу и кальцификации (очаг Гона). В
этом очаге бактерии персистируют, но
во внешнюю среду не выделяются.

В
других случаях развивается острый
туберкулез.

2. Вторичный
туберкулез. Протекает хронически.
Возникает при реактивации первичного
очага (через 5 лет и более). Возможно
также реинфицирование извне.

Развитию
вторичного туберкулеза способствуют
неблагоприятные условия жизни, хронические
заболевания, алкоголизм, стрессы и др.

Особенности
иммунитета при туберкулезе:

1) нестерильный,
поддерживается теми бактериями, которые
персистируют в организме;

2) неустойчивый,
т. е. не предохраняет от реактивации
эндогенной инфекции и реинфекции извне;

3) антитела
образуются, но они не имеют защитного
значения;

4) основной
механизм иммунитета – клеточный;
основное значение имеет инфекционная
аллергия.

Морфология и культуральные свойства

Возбудитель
относится к роду Mycobakterium, вид M. tuberculesis.

Это
тонкие палочки, слегка изогнутые, спор
и капсул не образуют. Клеточная стенка
окружена слоем гликопептидов, которые
называются микозидами (микрокапсулами).

Туберкулезная
палочка тяжело воспринимает обычные
красители (по Грамму окрашивается
24–30 ч). Грамположительна.

Туберкулезная
палочка имеет особенности строения и
химического состава клеточной стенки,
которые отражаются на всех биологических
свойствах. Главная особенность – в
клеточной стенке содержится большое
количество липидов (до 60 %). Большинство
из них – миколовые кислоты, которые
входят в каркас клеточной стенки, где
находятся в виде свободных гликопептидов,
входящих в состав корд-факторов.
Корд-факторы обуславливают характер
роста в виде жгутов.

В
состав клеточной стенки входит
липоарабиноманан. Его терминальные
фрагменты – кэп – определяют способность
возбудителя специфически связываться
с рецепторами макрофагов.

Микобактерии
туберкулеза окрашиваются по Цилю-Нильсену.
Этот метод основан на кислотоустойчивости
микобактерий, которая определяется
особенностями химического состава
клеточной стенки.

В
результате лечения противотуберкулезными
препаратами возбудитель может утратить
кислотоустойчивость.

Для
микобактерий туберкулеза характерен
выраженный полиморфизм. В их
цитоплазматической мембране обнаруживаются
характерные включения – зерна Муха.
Микобактерии в организме человека могут
переходить в L-формы.

По
типу получения энергии аэробы. По
требованиям к температуре – мезофилы.

Размножение
их происходит очень медленно, время
генерации – 14–16 ч. Это связано с
выраженной гидрофобностью, которая
обусловлена высоким содержанием липидов.
Это затрудняет поставку питательных
веществ в клетку, что снижает метаболическую
активность клетки. Видимый рост на
средах – 21–28 дней.

Микобактерии
требовательны к питательным средам.
Факторы роста – глицерин, аминокислоты.
Растут на картофельно-глицериновых,
яично-глицериновых и синтетических
средах. Во все эти среды необходимо
добавлять вещества, которые ингибируют
рост контаминирующей флоры.

На
плотных питательных средах образуются
характерные колонии: морщинистые, сухие,
с неровными краями, не сливаются друг
с другом.

В
жидких средах растут в виде пленки.
Пленка сначала нежная, сухая, со временем
утолщается, становится бугристо-морщинистой
с желтоватым оттенком. Среда при этом
непрозрачная.

Туберкулезные
бактерии обладают определенной
биохимической активностью, и изучение
ее используется для дифференцировки
возбудителя туберкулеза от других
представителей группы.

Факторы
патогенности:

миколовые
кислоты;

корд-фактор;

сульфатиды;

микозиды;

липоарабиноманан.

Также в разделе

	Осложнения туберкулеза: ателектаз, амилаидоз, свищи Осложнения являются дополнением к основному диагнозу. В классификации туберкулеза приведен перечень осложнений, которые регистрируют наиболее часто. Под…
	Лихорадка, геморрагическая лихорадка денге, костоломная лихорадка Геморрагическая лихорадка денге (костоломная лихорадка, лихорадка «жирафов») — острая вирусная природно-очаговая болезнь с трансмиссивным механизмом передачи….
	Сибирская язва (antrax) Сибирская язва — острая зоонозная инфекция, протекающая с выраженной интоксикацией, образованием карбункулов на коже (кожная форма) или в виде сепсиса….
	Стрептококковые инфекции. Внутрибольничные инфекции. Клинические формы стрептококковой инфекции. Принципы лечения. Профилактика. Стрептококковые инфекции продолжают оставаться в числе наиболее острых проблем здравоохранения во всех странах мира. Трудно найти раздел медицины, в котором…
	Ку-лихорадка (febris Q). Клиническая картина. Лечение. Профилактика. Ку-лихорадка — зоонозный острый риккетсиоз с развитием ретикулоэндотелиоза, синдрома интоксикации, часто с атипичными пневмониями. Краткие…
	Инфекционный мононуклеоз: причины и симптомы Инфекционный мононуклеоз - заболевание, известное также под названиями железистая лихорадка, болезнь Филатова, моноцитарная ангина, болезнь Пфейфера,…
	Инфекционный мононуклеоз (mononucleosis infectiosa). Клиническая картина. Лечение. Профилактика. Инфекционный мононуклеоз — острое антропонозное вирусное инфекционное заболевание с лихорадкой, поражением ротоглотки, лимфатических узлов, печени и…
	Воспаление миндалин Воспаление миндалин - процесс, который характеризует ряд инфекционных болезней, при которых патологический процесс касается верхних дыхательных путей….
	Туберкулез кожи, подкожной клетчатки Туберкулезное поражение кожи - явление достаточно редкое. Однако можно отметить в последнее время тенденцию к постоянному росту заболеваемости как в России…
	Коклюш (pertussis). Паракоклюш. Причины. Симптомы. Диагностика. Лечение. Коклюш — острая антропонозная бактериальная инфекция, сопровождающаяся катаральными явлениями в верхних дыхательных путях и приступообразным спазматическим…

Бактерии, вызывающие туберкулез

Скажем несколько слов о самой болезни. Туберкулез – заболевание, которое относится к инфекционным.

Поражает болезнь не только человека, но и животных. Эта болезнь всегда клинически реализуется, имеет генетическую предрасположенность и зависит от факторов окружающей среды.

Как правило, туберкулез поражает легкие, однако могут страдать и другие органы, и системы (лимфатические узлы, кишечник, кости, почки, репродуктивные органы, центральная нервная система и т.д.).

При развитии болезни появляются характерные гранулемы, это небольшие зернышки, которые похожи на бугорки и узелки.

В древности туберкулез называли «чахоткой». И лишь в 1882 году Генрих Кох (немецкий микробиолог) смог обнаружить возбудителя болезни и вывести его в сывороточной среде.

За свое исследование в 1905 году учёный получил Нобелевскую премию. Какие еще микроорганизмы вызывают туберкулез?

Микробиология нашла ответ на этот вопрос. Возбудителями туберкулеза являются специфические микобактерии, которые относятся к группе Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis и другими близкородственными видами.

Всего ученый свет знает более 150 видов таких бактерий. Данный микроорганизм по-старому называют «палочкой Коха» на честь знаменитого немецкого ученого, открывшего научному миру эту бактерию.

У человека туберкулез может вызвать одна из трех типов микобактерий:

«Палочка Коха», по латыни именуемая M. Tuberculоsis. Этот микроорганизм вызывает около 92% всех случаев болезни.
Бычий вид, М. bоvis. Данный возбудитель туберкулеза встречается в 5% случаев.
Промежуточный тип, М. аfriсаnum, который чаще всего поражает жителей Южной Африки и встречается в 3% случаев.

Очень редко можно заразиться туберкулезом от микобактерии птичьего или мышиного типа, являющихся большой редкостью и чаще встречающихся у людей, зараженных иммунодефицитом.

Генетика и изменчивость микобактерий

Носителями генетической информации микобактерий туберкулеза являются хромосомы и внехромосомные элементы - плазмиды. Главное отличие между хромосомами и плазмидами заключается в их размерах. Плазмида сравнению с хромосомой значительно меньше и поэтому несет меньшее количество генетической информации. Именно благодаря своим малым размерам плазмида хорошо приспособлена к перенесению генетической информации из одной микобактериальной клетки в другую.

Плазмиды могут взаимодействовать с хромосомой. Гены устойчивости микобактерий туберкулеза против химиопрепаратов локализуются и в хромосомах, и в плазмидах.

У микобактерии есть ДНК, которая функционирует как главный носитель генетической информации. Последовательность нуклеотидов в молекуле ДНК - это ген. Генетическая информация, которую несет ДНК, не является чем стабильным и неизменным. Она изменчива и эволюционирует, совершенствуясь. Единичные мутации обычно не сопровождаются большими изменениями информации, заложенной в геноме. С одного штамма может возникнуть несколько различных фенотипов (или признаков, проявляющихся в результате действия генов в определенных условиях), которые устойчивы против определенного антимикобактериального препарата.

Мутация может проявляться и в изменении морфологии колоний. Так, если изменить вирулентность микобактерий туберкулеза, то может измениться и морфология колоний мутантов.

Трансдукция - это перенос генетического материала (частицы ДНК) от одной микобактерии (донора) к другой (реципиенту), что приводит к изменению генотипа микобактерии-реципиента.

Трансформация - это включение в хромосому или плазмиду микобактерии (реципиента) фрагмента ДНК другой микобактерии (донора) в результате переноса изолированной ДНК.

Конъюгация - это контакт клеток микобактерии туберкулеза, во время которого происходит переход генетического материала (ДНК) из одной клетки в другую.

Трансфекция - это воспроизведение вирусной формы микобактерии туберкулеза в клетке, которая инфицирована изолированной вирусной нуклеиновой кислотой.

Изложенные гипотетические пути переноса генетической информации еще не изучены. Однако несомненно, что эти генетические процессы являются основой для возникновения лекарственной устойчивости как в отдельных микобактерий, так и у всей бактериальной популяции, имеющейся в организме больного.

Антигены

Микобактерии имеют специфические видовые и межвидовые и даже межродовые антигенные связи. В отдельных штаммах выявлены различные антигены. Однако все без исключения микобактерии содержат вещества, устойчивые к нагреванию и воздействию протеолитических ферментов - полисахариды, которые являются общим антигеном.

Кроме того, различные виды микобактерий имеют свои специфические антигены. А. П. Лысенко (1987) доказал, что все штаммы M. bovis имеют идентичный антигенный спектр с 8 антигенов, из которых 5-6 были общеродовыми и реагировали с антисыворотками к микобактерий других видов: 6 - с M. tuberculosis, 3-5 - M. kansasii и т.д.

Диагностика МБТ

Для диагностики туберкулеза применяют туберкулодиагностику, которая заключается в реакции организма на введение туберкулина. Туберкулин получают из бацилл (предварительно убитых и высушенных), он содержит молекулы, характерные для МБТ.

Если в организме имеются аналогичные бактерии с похожим химическим составом, то возникает аллергическая реакция (в месте внутрикожного введения препарата образуется папула).

Из лабораторных методов применяют:

интерфероновый тест;
ИФА (выявляет антитела к палочке, свидетельствует о факте инфицирования);
квантифероновый тест.

В анализе крови при туберкулезе обнаруживается увеличение количества лейкоцитов, ускоренная СОЭ. В биохимическом анализе при туберкулезе снижается уровень глобулинового коэффициента.

При исследовании мокроты у носителей бактерий Коха могут обнаружить примесь крови и гной, а также содержание белка (при туберкулезе его количество увеличивается) и др.

Обнаружить диссеминированный туберкулез позволяет анализ лимфы. При внелегочных формах заболевания исследуют мочу, различные ткани.

Наиболее доступный аппаратный метод диагностики - флюорография. Позволяет обнаружить патологические изменения в ткани легких и определить их локализацию.

Компьютерная томография проводится для выявления места нахождения бактерии Коха и подтверждения диагноза.

Бациллы быстро приобретают устойчивость к лекарственным средствам и передают потомкам генетическую память.

Лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза возникает после мутаций в генах МБТ (чаще в результате применения неправильных схем химиопрепаратов).

Лечение и профилактика

проветривание помещения;
укрепление иммунитета;
раннюю диагностику и лечение;
отказ от вредных привычек.

Лечение и профилактика

У пациентов, заболевших впервые, бактерии легче поддаются воздействию лекарственных препаратов. Труднее лечить рецидивы, поскольку бацилла Коха обладает способностью быстро адаптироваться.

При назначении лечения учитывают виды развития специфических процессов. Этиотропная терапия состоит из 2 стадий: интенсивной и пролонгированной, проводится по схемам. 3-компонентная схема включает применение Изониазида, ПАСКа, Стрептомицина. В 4-компонентую схему входят Канамицин, Рифампицин, Этионамид, Фтивазид. При лечении сложных мультирезистентных форм патологии применяют 5-компонентную схему: к предыдущему варианту добавляют Ципрофлоксацин.

Пациенту назначают комплексное питание с обязательным введением в рацион белков, углеводов, жиров.

Санаторно-курортное лечение способствует насыщению легких кислородом, прекращению развития и роста бактерий Коха.

Оперативное лечение применяют для нейтрализации очага, представляющего угрозу для жизни. Удаляют часть легкого или весь орган.

Инфицирование микобактериями туберкулеза не всегда ведет к развитию заболевания. Иммунитет к туберкулезу может развиваться после проведения специфической профилактики (иммунизации вакциной БЦЖ).

Неспецифическая профилактика включает:

проветривание помещения;
укрепление иммунитета;
раннюю диагностику и лечение;
флюорографию для взрослых и пробу Манту для детей;
отказ от вредных привычек.

Используя меры профилактики, можно предупредить развитие болезни.

Типы микобактериоза

Различают три типа микобактериоза, которые зависят от вида микобактерий и иммунного статуса организма:

1. Генерализованная инфекция с развитием видимых невооруженным глазом патологических изменений внешне напоминают туберкулезные, но гистологически несколько отличаются от них. В легких обнаруживают диффузные интерстициальные изменения без гранулем и полостей распада. Основными признаками являются повышение температуры тела, двусторонняя диссеминация в средних и нижних отделах легких, анемия, нейтропения, хроническая диарея и боль в животе. Диагноз подтверждается нахождением возбудителя в мокроте, кале или биопсией. Эффективность лечения низкая, смертность высокая и достигает 20%. Эффективными для лечения при микобактериоза является циклосерин, этамбутол, канамицин, рифампицин и частично стрептомицин.

2. Локализованная инфекция - характеризуется наличием макро- и микроскопических поражений, выявляемых в определенных участках тела.

3. Инфекция, которая протекает без развития видимых поражений; возбудитель находится в лимфатических узлах.

Туберкулез у людей преимущественно (95-97%) возникает вследствие заражения человеческим, реже (3-5%) бычьим и казуистически - птичьим видом микобактерий туберкулеза. М. africanum вызывает туберкулез у людей в странах Тропической Африки.

М. tuberculosis

Микобактерии туберкулеза имеют форму тонких, длинных или коротких, прямых или искривленных палочек, длиной 1,0-4,0 мкм и диаметром 0,3-0,6 мкм; неподвижные, спор и капсул не образуют, грамположительные, имеют большой полиморфизм.

Микобактерии туберкулеза человеческого вида более тонкие и длинные, чем бычьего. Микобактерии бычьего вида менее патогенны для людей, и заболевание, вызванное ими, встречается значительно реже. Для определения МБТ человеческого вида применяют ниациновий тест. Он базируется т том, что МБТ этого вида выделяют больше ниацина (никотиновой кислоты).

Молодые бактерии гомогенные, в процессе их старения образуется зернистость (зерна Муха), которая более подробно изучается методом электронной микроскопии. Зернистая форма микобактерий туберкулеза образуется также под влиянием антимикобактериальных препаратов. После введения зерен животным у них возникает кахексия, увеличение лимфатических узлов или заболевания туберкулезом с развитием типичных штаммов микобактерий туберкулеза. Описанные оскольчатые формы микобактерий туберкулеза. Возбудитель туберкулеза может существовать также в виде фильтрующихся форм.

Под влиянием противотуберкулезных препаратов морфологические и физико-химические свойства микобактерий туберкулеза изменяются. Микобактерии становятся короткими, приближаясь к кокобацилам, их кислотостойкость уменьшается, поэтому при окраске по Цил-Нильсену они обесцвечиваются и не определяются.

Состав микобактерии

Микобактерия состоит из клеточной оболочки и цитоплазмы. Клеточная оболочка трехслойная и состоит из наружного, среднего и внутреннего слоев. В вирулентных микобактерий она имеет толщину 230-250 нм.

Внешний слой, окружающий клетку, называют микрокапсулой. Она образована полисахаридами и содержит фибриллы. Микрокапсула может окружать целый популяцию микобактерий, а также помещаться на местах прилегания микобактерий друг к другу. Отсутствие или наличие роста, его интенсивность и состав микрокапсулы зависят от того, какое количество корд-фактора экстрагируется из цитоплазмы в клеточную стенку. Чем больше корд-фактора экстрагируется, тем лучше выражена микрокапсула у микобактерий туберкулеза.

Клеточная оболочка участвует в регуляции метаболических процессов. В ней содержатся видоспецифические антигены, благодаря чему клеточная стенка является локусом, где происходят аллергические реакции повышенной чувствительности замедленного типа и образование антител, поскольку она, как собственно поверхностная структура бактериальной клетки, первой контактирует с тканями макроорганизма.

Под клеточной оболочкой расположена трехслойная цитоплазматическая мембрана, тесно прилегает к цитоплазме. Она состоит из липопротеидных комплексов. В ней происходят процессы, обусловливающие специфичность реакции микобактерий на факторы окружающей среды.

Цитоплазматическая мембрана микобактерий туберкулеза путем своей центростремительной инвагинации формирует в цитоплазме внутрицитоплазматическая мембранную систему - мезос. Мезосомы - полуфункциональные структуры. В них содержится много ферментных систем. Они участвуют в синтезе и формировании клеточной стенки и выполняют роль посредника между ядром и цитоплазмой бактериальной клетки.

Цитоплазма микобактерий состоит из гранул и включений. У молодых микобактерии туберкулеза цитоплазма более гомогенная и компактная, чем у старых, у которых в цитоплазме больше вакуоль и полостей. Основную массу гранулярных включений составляют рибосомы, располагающиеся в цитоплазме в свободном состоянии или образующие полисомы - скопление рибосом. Рибосомы состоят из РНК и белка и синтезируют специфический белок.

Иммуногенность микобактерий туберкулеза обусловлена в основном антигенными комплексами, содержащихся в оболочках микобактериальных клеток. Рибосомы, рибосомный белок и цитоплазма микобактерий имеют антигенную активностью в реакциях замедленного типа.

Патогенность микобактерий туберкулеза

Патогенность - это видовое свойство микобактерий туберкулеза, оказывается возможностью вызвать заболевание. Главным фактором патогенности являются токсические гликолипиды - корд-фактор. Это вещество, которое склеивает вирулентные микобактерии, благодаря чему они растут на питательных средах, в виде жгутов. Корд-фактор обусловливает токсическое действие на ткани и защищает туберкулезные палочки от фагоцитоза, блокируя окислительное фосфорилирование в митохондриях макрофагов. Поэтому, поглощены фагоцитами, они размножаются в них и вызывают их гибель. Кислотостойкие сапрофиты не образуют корд-фактора.

Вирулентность - степень патогенности; возможность роста и размножения микобактерий в определенном макроорганизме и способность вызывать специфические патологические изменения в органах. Вирулентным считают штамм микобактерий в том случае, когда он в дозе 0,1 0,01 мг вызывает заболевания туберкулезом, а через 2 месяца — смерть гвинейской свинки массой 250-300 г. Когда после введения этой дозы животное умирает через 5 6 месяцев, то этот штамм считают слабовирулентным. Вирулентность не является неизменным свойством микобактерий. Она снижается при старении культуры или выращивание на искусственных питательных средах и в процессе лечения больных. При пассажах на животных или в случаях обострения туберкулезного процесса вирулентность возрастает.

Размножение микобактерий туберкулеза

Микобактерии туберкулеза размножаются поперечным делением, ветвлением или отпочкование отдельных зерен. Микобактерии туберкулеза растут на питательных средах при наличии кислорода. Но они являются факультативными аэробами, т.е. растут и когда доступа воздух не имеет - кислород они получают из углеводов. Поэтому для выращивания микобактерий требуется питательная среда, богатая углеводами.

Эффективны плотные среды, в состав которых входят яйца, молоко, картофель, глицерин. Чаще применяют среды Левенштейна-Иенсена, Гельберга, Финна-2, Миддлбрука, Огава. Микобактерии туберкулеза растут медленно. Первые колонии появляются на 12-30-й день, а иногда и через 2 месяца. Для обеспечения роста микобактерий туберкулеза к питательным средам добавляют 3-6% глицерина. Микобактерии лучше растут в слабо-щелочной среде, хотя могут расти и в нейтральной.

Добавление желчи в питательную среду замедляет их рост. Это обстоятельство использовали Кальметт и Герен при разработке вакцины. На жидких питательных средах с добавлением глицерина микобактерии туберкулеза растут в виде пленки. Колонии микобактерий могут быть шероховатыми (К.-варианты) и реже - гладкими, сливающимися между собой (8-варианты). К.-варианты микобактерий вирулентные для людей и животных, а 8-варианты чаще невирулентные.

Биохимические особенности

Поговорим о бактериальной составляющей и среде обитания микроорганизмов. Микобактерии туберкулеза очень чувствительны к прямым солнечным лучам.

Так, при жаркой погоде в мокроте, в которой обитают инфекции, они могут погибнуть в течении двух часов.

Особенно они чувствительны к ультрафиолетовому свету. Также микобактерии умирают при нагревании.

При 60 градусах и влажной среде они погибнут в течении часа, при 65 градусах – при 15 минутах, при 80 градусах – в течении 5 минут.

Что интересно, в свежем некипяченом молоке такие бактерии способны жить в течении 10 дней, а в сливочном масле или твердых сырах несколько месяцев. Такие микроорганизмы более устойчивы против большинства дезинфицирующих средств.

Так, пятипроцентный раствор фенола с 10-% лизола способны уничтожить бациллы в течении 24 часов! А раствор формалина – после 12 часов.

Палочка устойчива к замораживанию. В сточных водах она способна прожить около года, в навозе – до 10 лет. Даже в полностью высушенном состоянии она может находиться жизнеспособной в течении 3 лет!

Если не вдаваться в сложнейшие биохимические процессы, происходящие при метаболизме микобактерий, то коротко можно отметить следующее: клетки туберкулезных бактерий очень гибки, изменчивы и устойчивы к различным изменениям в окружающей среде.

При определенных условиях они могут жить по нескольких лет, «выжидая» жертву! Именно поэтому порой недостаточно просто вовремя прививаться от этого заболевания.

Какими тогда противотуберкулезными профилактическими средствами пользоваться?

Формы поведения

Оказавшись в организме человека, бактерия начинает размножаться (при ослаблении защитных сил организма) или бездействовать (если иммунитет хороший).

Физиология микобактерий туберкулеза: в зависимости от активности окислительных ферментов удается различать сапрофитные и патогенные виды, механизм устойчивости к лекарственным средствам, вирулентности микроорганизмов.

Снижение устойчивости населения к туберкулезу, частое и продолжительное применение антибиотиков стало причиной изменчивости возбудителя.

Потенциально опасными для людей являются: M.konsasii, M.scrofulaceum, M.marinum, M.xeponi, M.fortuitum, M.ulcerans, M.chelonei, которые у человека вызывают туберкулез.

Для выявления возбудителя туберкулеза применяют метод ПЦР, при котором в образце биоматериала обнаруживают ДНК микобактерии туберкулеза.

Инфекционная гранулема - основная морфологическая составляющая воспалительного процесса, вызванного проникновением микобактерий в органы.

В результате воспаления происходит образование специфических гранулем и поражение организма (чаще зрелого, но иногда патология развивается в молодом возрасте).

При отсутствии сопротивления со стороны организма МБТ, развиваясь, провоцируют активную форму заболевания. Более распространенной является закрытая форма, которую трудно обнаружить: у носителя редко отмечается ухудшение здоровья.

Классификация микобактерий туберкулеза включает биологические и морфологические признаки. Микобактерии различают:

по влиянию на организм;
по способности использовать питательные вещества;
по росту при разных температурах.

Диагностика МБТ

В наше время существуют следующие методы выявления микобактерий туберкулеза:

клинический анализ крови – если палочка Коха прогрессирует, то данный тест покажет повышенный уровень лейкоцитов;
биохимический анализ крови – с его помощью выявляется альбумин – глобулиновый коэффициент, уровень которого при остром туберкулезе ниже нормы. Биохимический анализ также покажет содержание ангиотензин – конвертирующего фермента в крови, активность которого растет при фиброзных изменениях в легких;
исследование мокроты – мокрота носителя палочки Коха может содержать гной и примеси крови (открытая форма болезни). Данный анализ установит количество белка в мокроте (большое количество белка указывает на заболевание), определит бациллы M. tuberculosis и другие вещества (холестерин, соли кальция, эластичные волокна). Эти суммарные данные указывают на распад легкого;
микробиологическая диагностика – для обнаружения МБТ у пациента берут мокроту и помещают ее в стерильную емкость. Затем работники лаборатории наблюдают характер роста бактерий, их резистентность (устойчивость) к антибиотикам и другим препаратам. Микробиологический анализ может производиться в течение 20-90 дней;
рентген – благодаря этому основному методу определения МБТ можно наглядно увидеть присутствие микобактерий в легких человека, разницу между пневмонией и туберкулезом, определить этап распространения вируса в легких;
проба Манту – разновидность туберкулиновой пробы, производимая путем введения под кожу туберкулина. Если диаметр папулы через 2-3 дня после введения вещества составляет более 10 мм, тогда пациент находится в группе риска или заражен туберкулезом;
накожная проба Пирке – данный анализ проводится путем нанесения обработанным туберкулином скарификатором царапины на кожу пациента в области предплечья. Градуированную пробу Пирке применяют для выявления M. tuberculosis у детей и подростков. По результатам анализа, если через 2-3 суток у пациента наблюдается папула шириной от 4 мм и более, тогда есть вероятность заражения палочкой Коха.

В случае если при помощи вышеуказанных методов обнаружить МБТ не удалось, тогда необходимо провести дополнительные исследования такими способами:

компьютерная томография – благодаря этому методу исследования можно выявить место нахождения микроба Mycobactérium tuberculósis, изображение поврежденного органа и установить заболевание;
серологические, иммунологические исследования крови и мокроты:

ИФА – иммуноферментный анализ крови. При помощи этого теста можно выявить антитела к микобактериям туберкулеза, которые указывают на заражение пациента МБТ;
РПГА – помогает определить активную внелегочную форму заболевания, установить тип вредоносных микобактерий, а также подтвердить правильность поставленного диагноза;
квантифероновый тест – высокая точность этого исследования крови (до 99%) ясно укажет на присутствие МБТ. Результат теста можно узнать через несколько часов.

биопсия – данный анализ производится путем взятия пункции из зараженного органа (легкого, плевры, лимфатических узлов) для ее дальнейшего исследования. Результат анализа точен в 80-90% случаев;
бронхоскопия – этот прием проводится при наличии симптомов туберкулеза бронхов. Такой метод выявляет изменения в слизистой оболочке крупных бронхов, их сужение и наличие отверстий в бронхах.

Кроме вышеуказанных есть и другие способы исследования палочки Коха, например, анализ мочи (при туберкулезе мочевыводящих путей и почек, костей), люминесцентная микроскопия, выявляющая МБТ при небольшом их количестве и др.

Изменчивость микобактерий

Изменчивость микобактерий - это свойство их приобретать новые или / и терять старые признаки. В связи с тем, что у микобактерий туберкулеза короткий период генерации, высокая частота мутаций и рекомбинаций, обмена генетической информацией, изменчивость в них весьма высока и частая (Н. А. Васильев и соавт., 1990).

Различают фенотипическую и генотипическую изменчивости. Фенотипическую мутацию называют еще модификационной, которой свойственна высокая частота изменений и их частая реверсия в исходную форму, адаптация к изменениям внешней среды отсутствие изменений в генетическом коде. Она наследственно не передается.

Генотипическая мутация наступает вследствие мутаций и рекомбинаций.

Мутации - это стабильные унаследованные изменения в нуклеотидном составе генома микобактерии включая плазмиды. Они бывают спонтанные и индуцированные. Спонтанные мутации возникают со специфической для данного гена скоростью. Большинство из них являются следствием ошибок в репликации и репарации ДНК. Индуцированные мутации возможны в результате воздействия мутагенов (ультрафиолетовая; ионизирующая радиация, химические вещества и т.п.). Мутации часто приводят к появлению в фенотипе нового признака или потери старой признаки (по сравнению с родительской формой).

Рекомбинации генетические - это процесс образования потомства, содержащее признаки донор; и реципиента.

Одним из видов изменчивости микобактерий туберкулеза является образование ими фильтрующиеся формы . Это очень мелкие, невидимые при обычной микроскопии формы, имеющие очень слабую вирулентность, их можно обнаружить только при реверсии, используя для этого повторные пассажи на морских свинках. В этих случаях иногда обнаруживают кислотостойкие палочки с очень низкой вирулентностью.

Фильтрующиеся формы - это мелкие фрагменты микобактерий туберкулеза, образующиеся в неблагоприятных условиях существования и способны к реверсии. Природа этих форм, их структура, а также значение в патогенезе туберкулеза до сих пор окончательно не установлено.

Виды лекарственной устойчивости

Первичная медикаментозная устойчивость - устойчивость, обнаруженная у впервые выявленных больных, которые никогда не принимали противотуберкулезные препараты.

Начальная медикаментозная устойчивость - устойчивость МБТ, выявленная у впервые выявленных больных, леченных противотуберкулезными препаратами не более 4 недель или у больных при отсутствии данных о предшествующем лечении. Вторичная (приобретенная) медикаментозная устойчивость - резистентность МБТ, обнаружена у больных, которым назначали противотуберкулезные препараты более 4 недели. Монорезистентность - устойчивость МБТ против 1 из 5 препаратов I ряда (изониазиду стрептомицина, рифампицина, этамбутола, пиразинамида).

В Украине частота возникновения первичной резистентности возбудителя туберкулеза против препаратов I ряда отмечается в 23-25%, а вторичной - в 55-56% случаев. Множественная лекарственная устойчивость - устойчивость МБТ против двух и больше препаратов. Мультирезистентность - это разновидность множественной лекарственной устойчивости, и именно - устойчивость возбудителя только против комбинации изониазид + рифампицин или и рядом: другими препаратами.

Результат определения чувствительности микобактерий туберкулеза к противотуберкулезным препаратам называется антибиограмой.

Причины лекарственной устойчивости:

1. Биологические - недостаточная концентрация препарата, индивидуальные особенности организма пациента (скорость инактивации препаратов)

2. Причины, обусловленные пациентом - контакт с больными химиорезистентным туберкулез, нерегулярный прием препаратов, преждевременное прекращение приема лекарств, неудовлетворительная переносимость препаратов, проведение неадекватного лечения.

3. Факторы, обусловленные болезнью - при изменении доз препаратов, при большом количестве МБТ в участках пораженного органа может возникать определенная рН, которая препятствует активному действию лекарств, лечение одним препаратом, недостаточная доза или продолжительность лечения.

Геном микобактерий туберкулеза

В последние годы интенсивно проводили генетические исследования штамма М. tuberculosis. Количество гуанинцитозиновых основ, которые распределяются на спирали дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), составляет 65,5%. Геном содержит много вставных последовательностей, мультигенных семей, амплифицированных (удвоенных) мест собственного обмена веществ.

РНК-молекулы кодируют около 50 генов, в частности:

три вида рибосомных РНК, которые синтезируются из уникального рибосомного оперона;
гены, кодирующие 108-РНК, включается в процесс разрушения белков (выявлено, что эти 108-РНК кодируются так называемыми ненормальными и РНК-мессенджерами);
гены, кодирующие РНК-компонентную РНКазу Р;
гены транспортных РНК.

М. tuberculosis имеет 11 рецепторзависимых гистидинкиназ, несколько цитоплазматических киназ и немного генов, участвующих в регуляторных каскадах. В М. tuberculosis является группа эукариотических серинтиреонинових протеинкиназ, отвечающих за фосфорилирование в бактериальной клетке.

Для осуществления липидного обмена в М. tuberculosis синтезируются приблизительно 250 ферментов. Окисление жирных кислот обеспечивают такие ферментные системы:

1. РабА / РабВ-Р-оксидазные комплексы.

2. Тридцать шесть ацил-СоА-синтетаз и группа из тридцати шести ацил-СоА-синтетазсвязанных белков.

3. Пять ферментов, завершают цикл окисления (реакция тиолиза 3 кетоэстеров).

4. Четыре гидроксиацил-СоА-дегидрогеназы.

5. Двадцать один вид белков эноил-СоА-гидратазо-изомеразной группы.

6. Ацетил-СоА-С-ацетилтрансферазы.

Патогенность М. tuberculosis обусловлена также такими факторами, как: 1) антиоксидазная каталазная-пероксидазная система;

2) сигма-фактор;

3) МСЭ-оперон, кодирующий белки внутриклеточной инвазии;

4) фосфолипаза С;

5) ферменты, продуцирующие компоненты клеточной стенки;

6) гематоглобиноподобные Ре-связующие белки, которые обеспечивают длительное анаэробное существование микобактерий;

7) эстеразы и липазы;

8) значительная антигенная лабильность;

9) наличие различных путей обеспечения антибиотикорезистентности;

10) наличие актериоцинов с цитотоксическим действием (некоторые поликетины).

Химический состав микобактерий туберкулеза

Химический состав микобактерий туберкулеза изучен достаточно хорошо. Они содержат 80% воды и 2-3% золы. Сухой остаток наполовину состоит из белков, преимущественно туберкулопротеинов, липидов - от 8 до 40%, столько же полисахаридов. Предполагают, что туберкулопротеины являются полноценными антигенами и могут вызывать у животных состояние анафилаксии. Липидная фракция приводит резистентность возбудителя туберкулеза, а полисахаридная участвует в иммуногенезе.

Туберкулопротеины и липидные фракции обусловливают токсичность микобактерий туберкулеза, которая присуща не только живым, но и убитым микроорганизмам. Выявлено три фракции липидов: фосфатидная, жировая и восковая. Большое содержание липидов отличает микобактерии туберкулеза от других видов микроорганизмов и приводит следующие свойства:

1. Устойчивость к кислотам, щелочам и спиртам (преимущественно обусловлено наличием миколевой кислоты).

2. Устойчивость против обычных дезинфицирующих веществ.

3. Патогенность туберкулезных микобактерий.

Экзотоксины не определены, но сами клетки микобактерий токсичные — приводят к частичному или полному распаду лейкоцитов. В неорганическом остатке микобактерий туберкулеза определяют соли железа, магния, марганца, калия, натрия, кобальта. Антигенная структура микобактерий сложная и еще не в совершенстве изучена.

1. Морфология и культуральные свойства

Клеточная стенка окружена слоем гликопептидов, которые называются микозидами (микрокапсулами).

Туберкулезная палочка тяжело воспринимает обычные красители (по Грамму окрашивается 24–30 ч). Грамположительна.

Туберкулезная палочка имеет особенности строения и химического состава клеточной стенки, которые отражаются на всех биологических свойствах. Главная особенность – в клеточной стенке содержится большое количество липидов (до 60 %). Большинство из них – миколовые кислоты, которые входят в каркас клеточной стенки, где находятся в виде свободных гликопептидов, входящих в состав корд-факторов. Корд-факторы обуславливают характер роста в виде жгутов.

В состав клеточной стенки входит липоарабиноманан. Его терминальные фрагменты – кэп – определяют способность возбудителя специфически связываться с рецепторами макрофагов.

Микобактерии туберкулеза окрашиваются по Цилю-Нильсену. Этот метод основан на кислотоустойчивости микобактерий, которая определяется особенностями химического состава клеточной стенки.

По типу получения энергии аэробы. По требованиям к температуре – мезофилы.

Размножение их происходит очень медленно, время генерации – 14–16 ч. Это связано с выраженной гидрофобностью, которая обусловлена высоким содержанием липидов. Это затрудняет поставку питательных веществ в клетку, что снижает метаболическую активность клетки. Видимый рост на средах – 21–28 дней.

Во все эти среды необходимо добавлять вещества, которые ингибируют рост контаминирующей флоры.

На плотных питательных средах образуются характерные колонии: морщинистые, сухие, с неровными краями, не сливаются друг с другом.

В жидких средах растут в виде пленки. Пленка сначала нежная, сухая, со временем утолщается, становится бугристо-морщинистой с желтоватым оттенком. Среда при этом непрозрачная.

Туберкулезные бактерии обладают определенной биохимической активностью, и изучение ее используется для дифференцировки возбудителя туберкулеза от других представителей группы.

1) миколовые кислоты;

Возбудитель туберкулеза проникает в организм в составе мелкодисперсных аэрозолей. Возбудитель должен попасть в альвеолы, где они поглощаются резидентными макрофагами, взаимоотношение с которыми и определяет дальнейшее развитие инфекции. Туберкулез относится к классическим внутримакрофагальным инфекциям.

Внутри макрофагов туберкулезные бактерии оказываются устойчивыми к бактерицидным факторам фагоцитов благодаря мощной липидной оболочке.

Гранулема развивается сразу после инфицирования, но в дальнейшем она получает мощный импульс к развитию, когда в организме появляются Т-лимфоциты, сенсибилизированные к возбудителю.

Доиммунная гранулема через 2–3 недели под влиянием Т-лимфоцитов превращается в специфическую (постиммунную), которая называется туберкуломой.

Дальнейшие события связаны со специфическим воспалением, в основе которого лежит аллергическая реакция на бактериальные антигены.

Наиболее часто встречается туберкулез легких, но могут поражаться и кишечник, и опорно-двигательный аппарат, и мочеполовая система, и др.

Выделяют два патогенетических варианта туберкулеза.

Развивается без аллергии к возбудителю. В зоне внедрения возбудитель захватывается макрофагами, развивается неспецифическая гранулематозная реакция. Бактерии легко проходят этот барьер, быстро проникают в регионарные лимфатические узлы, кровь и различные органы.

Через 2–3 недели формируется первичный туберкулезный комплекс, включающий в себя:

1) первичный аффект – очаг в легочной ткани;

2) лимфаденит – воспаление регионарных лимфоузлов;

3) лимфангит – воспаление лимфатических сосудов.

Наиболее часто он самоизлечивается, подвергается фиброзу и кальцификации (очаг Гона). В этом очаге бактерии персистируют, но во внешнюю среду не выделяются.

В других случаях развивается острый туберкулез.

Возможно также реинфицирование извне.

Развитию вторичного туберкулеза способствуют неблагоприятные условия жизни, хронические заболевания, алкоголизм, стрессы и др.

Особенности иммунитета при туберкулезе:

1) нестерильный, поддерживается теми бактериями, которые персистируют в организме;

2) неустойчивый, т. е. не предохраняет от реактивации эндогенной инфекции и реинфекции извне;

3) антитела образуются, но они не имеют защитного значения;

4) основной механизм иммунитета – клеточный; основное значение имеет инфекционная аллергия.

3. Диагностика. Профилактика. Лечение

1) микроскопические исследование. Из мокроты делают два мазка. Один окрашивают по Цилю-Нильсену, второй обрабатывают флюорохромом и исследуют с помощью прямой флюоресцентной микроскопии. Является достоверным методом;

2) бактериологическое исследование. Является обязательным. Недостаток – микобактерии медленно растут на питательных средах (4 недели). В ходе исследования определяется чувствительность к туберкулостатическим препаратам.

Применяют ускоренные методы обнаружения микобактерий в посевах, например по методу Прайса. Микроколонии позволяют увидеть наличие корд-фактора, когда образовавшие его бактерии складываются в косы, цепочки, жгуты;

3) полимерная цепная реакция (ПЦР). Применяется при внелегочных формах;

4) серодиагностика – ИФА, РПГА, реакция флюоресценции. Не является ведущим методом;

5) проба Манту с туберкулином – аллергологический метод. Туберкулин – препарат из убитой культуры микобактерий. Проба ставится при отборе лиц для ревакцинации для оценки течения туберкулезного процесса;

6) микрокультивирование на стеклах в среде Школьникова;

7) биологический метод. Используется редко, когда возбудитель трудно выделить из исследуемого материала. Материалом от больного заражают лабораторных животных (морских свинок, кроликов). Наблюдение ведут до гибели животного, а затем исследуют пунктат его лимфатических узлов.

Специфическая профилактика: живая вакцина БЦЖ. Вакцинация осуществляется в роддоме на 4-7-й дни жизни внутрикожным методом.

Ревакцинацию проводят лицам с отрицательной туберкулиновой пробой с интервалом в 5–7 лет до 30-летнего возраста. Таким образом создают инфекционный иммунитет, при котором возникает реакция гиперчувствительности замедленного типа.

Большинство антибиотиков на микобактерии туберкулеза не действует, поэтому применяют туберкулостатические препараты.

Используется два ряда препаратов:

1) препараты первого ряда: изониазид, пиразинамид, стрептомицин, рифампицин, этамбутол, фтивазид;

2) препараты второго ряда (при неэффективности препаратов первого ряда): амикацин, каномицин, аминосалицилат натрия (ПАСК), дапсон, циклосерин и др.

Особенности терапии при туберкулезе:

1) лечение должно быть начато как можно раньше, сразу после выявления заболевания;

2) терапия всегда комбинированная – используется не менее двух препаратов;

3) проводится длительно (4–6 месяцев), что связано с большой продолжительностью жизненного цикла микобактерий;

4) должна быть непрерывной, так как перерывы ведут к формированию устойчивости возбудителя и хронизации процесса.

40. Туберкулез

Возбудитель относится к роду Mycobakterium , вид M. tuberculesis .

Это тонкие палочки, слегка изогнутые, спор и капсул не образуют.

В результате лечения противотуберкулезными препаратами возбудитель может утратить кислотоустойчивость.

Для микобактерий туберкулеза характерен выраженный полиморфизм. В их цитоплазматической мембране обнаруживаются характерные включения – зерна Муха. Микобактерии в организме человека могут переходить в L-формы.

Патогенез

В результате взаимодействия микобактерий и макрофагов под влиянием факторов вирулентности развивается воспаление гранулематозного типа.

Из легких туберкулезная палочка попадает в регионарные лимфатические узлы, далее – в кровоток.

Путь заражения воздушно-капельный. Источник – больной человек, который в острый период выделяет с мокротой туберкулезные палочки.

1. Первичный туберкулез. Возникает у лиц, ранее не имевших контакта с возбудителем. Инфицирование происходит в детском возрасте или подростковом периоде.

2. Вторичный туберкулез. Протекает хронически. Возникает при реактивации первичного очага (через 5 лет и более).

Патогенные микобактерии — Ф. К. Черкес

Глава 33. Возбудители туберкулеза

Представители семейства микобактерий Mycobacteriaceae имеют вид тонких, иногда ветвистых палочек, чем напоминают гриб. Медленный рост на питательных средах также сближает их с грибами. Эти особенности объясняют название семейства, рода — Mycobacterium.

Микобактерий кислото-щелоче- и спиртоустойчивы, что обусловливается наличием в оболочках их клеток жировосковых веществ.

Род микобактерий включает патогенных и непатогенных представителей. Патогенными для человека являются возбудители туберкулеза и возбудитель лепры.

Туберкулез широко распространен среди животных, птиц, грызунов.

Существуют несколько видов туберкулезных палочек:

1. Человеческий — Mycobacterium tuberculosis

2. Бычий — Mycobacterium bovis

3. Птичий — Mycobacterium avium

4. Мышиный — Mycobacterium murium

5. Встречаются микобактерий, вызывающие заболевания у холоднокровных. К ним относится особая группа атипичных микобактерий.

В настоящее время атипичные микобактерий приобретают особое значение. Их делят по ряду признаков на 4 группы: I, II, III, IV (по Раньону). Они отличаются от микобактерий туберкулеза меньшей требовательностью к питательным средам. Между собой они различаются по отношению к питательным средам, скорости роста, по способности образовывать пигмент, а также по каталазной и пероксидазной активности. Вызывают заболевания у человека представители групп I и III.

Морфология . Возбудители туберкулеза были открыты р. Кохом в 1882 г. Это тонкие палочки величиной 1,5-4 × 0,3-0,5 мкм. Они очень полиморфны: встречаются прямые, изогнутые, колбовидные. Как результат изменчивости бактерий, имеются кислотоподатливые формы и очень мелкие, так называемые зерна Муха. Разнообразие форм нередко зависит от состава среды, воздействия на них антибиотиков и химиотерапевтических средств. Бактерии туберкулеза неподвижны, не имеют спор и капсул. Грамоположительны, однако они плохо воспринимают анилиновые краски. Хорошо окрашиваются в красный цвет по методу Циля- Нильсена (см. рис. 4), где используются концентрированные краски и протравливание.

Культивирование . Возбудители туберкулеза — аэробы. Растут при температуре 37-38° С и рН среды 5,8-7,0, Отличительными культуральными особенностями туберкулезной палочки являются медленный рост и требовательность к питательным средам. Первично они растут только на специальных средах: среде Петраньяни, Петрова, Левенштейна — Йенсена. Их можно выращивать на глицериновом бульоне, глицериновом агаре, глицериновом картофеле. Глицерин стимулирует рост микобактерий. М. bovis не нуждаются в глицерине. Наибольшее распространение получила среда Левенштейна — Йенсена, которая рекомендована ВОЗ в качестве стандартной среды для выращивания туберкулезных палочек. В настоящее время пользуются также средой Финна II, которая отличается от среды Левенштейна — Йенсена тем, что вместо аспарагина в ней используется глутамин натрия. На этой среде микобактерий туберкулезарастут несколько быстрее, чем на среде Левенштейна — Йенсена, и процент выделения культур выше. Туберкулезные палочки можно культивировать и на синтетических средах, например среде Сотона.

Микобактерий туберкулеза встречаются в R- и S-форме. Более вирулентной является R-форма (М. bovis чаще встречается в R-форме). На плотных питательных средах возбудители туберкулеза образуют сухие морщинистые колонии кремового цвета с чуть приподнятым Центром и изрезанными краями (см. рис. 26). В жидких питательных средах микобактерий туберкулеза вырастают на 10-15-й день в виде пленки, которая постепенно утолщается, становится грубой, морщинистой, ломкой и в силу тяжести иногда падает на дно. Бульон под пленкой остается прозрачным.

Ферментативные свойства . Возбудители туберкулеза биохимически мало активны. У них обнаружен протеолитический фермент, который в определенных условиях (кислая и щелочная среда) расщепляет белок. Они расщепляют также некоторые углеводы, образуют уреазу. Но свойства эти непостоянны. Поэтому изучение ферментов не имеет диагностического значения.

Токсинообразование . Возбудители туберкулеза образуют эндотоксин — это белковое вещество впервые выделил Р. Кох (1890) и назвал его туберкулином. «Старый» туберкулин — это культуральная жидкость, полученная при росте культуры в глицериновом бульоне и выпаренная при 70° С до 1 / 10 своего первоначального объема. «Новый» туберкулин — очищенный белковый дериват туберкулина.

Туберкулин обладает свойствами аллергена. Он не оказывает токсического действия на здоровый организм. Его действие проявляется только в зараженном организме. Поэтому введение туберкулина используют с диагностической целью, в постановках аллергических проб (Пирке или Манту). Для этой цели туберкулин готовят из бычьего типа микобактерий туберкулеза.

Вирулентные штаммы возбудителей туберкулеза содержат особый липид корд-фактор, который способствует склеиванию микобактерий и росту их в виде кос и тяжей.

Антигенная структура . Микобактерий туберкулеза содержат антиген, в который входят белковые, липоидные и полисахаридные факторы. Этот антиген вызывает в организме выработку антител (агглютининов, преципитинов, комплементсвязывающих веществ и др.). Однако эти антитела обнаруживаются в малых концентрациях, поэтому практически с целью диагностики мало используются.

Устойчивость к факторам окружающей среды . Микобактерий туберкулеза самые устойчивые из неспороносных форм бактерий (устойчивость обусловливается наличием в их оболочке липидов). Температуру 100° С они переносят в течение 5 мин. УФ-лучи вызывают их гибель только через несколько часов.

В высохшей мокроте они живут до 10 мес. При низких температурах микобактерий туберкулеза длительно сохраняются.

Дезинфицирующие растворы: сулема (1:1000), карболовая кислота (5%) губят их только через сутки. Наиболее чувствительны они к хлорамину и хлорной извести.

Восприимчивость животных . К М. tuberculosis человек очень чувствителен, животные и птицы малочувствительны. Из экспериментальных животных к нему высокочувствительны морские свинки, у которых инфекция протекает генерализованно и заканчивается обычно гибелью животного.

К M. bovis чувствительны крупный и мелкий домашний скот и домашние животные (человек малочувствителен, но дети могут заражаться при использовании молока больных животных).

Из экспериментальных животных наиболее чувствительны кролики, у которых инфекция протекает генерализованно. М. avium вызывает заболевание у птиц: кур, голубей, фазанов и т. д. Однако могут болеть и некоторые животные (человек редко заражается).

Из экспериментальных животных чувствительны кролики. Инфекция протекает у них остро.

Мышиный вид патогенен главным образом для полевок. У кроликов и морских свинок заболевание протекает в хронической форме.

Источники инфекции . Человек. Реже животные.

Пути передачи . Наиболее частые пути передачи — воздушно-капельный и воздушно-пылевой; реже пищевой. Возможно внутриутробное инфицирование через плаценту.

Заболевания у человека и патогенез . Заболевание туберкулезом характеризуется многообразием клинических форм. Различают легочную (наиболее часто встречающуюся) и внелегочные формы: туберкулез желудка и кишечника, почек, мозговых оболочек, костей и других органов.

Каждая из этих форм может закончиться генерализацией процесса. При воздушно-капельном и воздушно-пылевом заражении первичный очаг возникает в легком. В пораженном органе образуется бугорок — tubercul. Бугорок представляет собой скопление лейкоцитов и гигантских клеток, внутри которых находятся микобактерий туберкулеза. При хорошей сопротивляемости организма соединительная ткань окружает бугорок, он обызвествляется и бактерии, оставаясь жизнеспособными, не выходят за пределы бугорка. Таков «очаг Гона» — обызвествленный, небольшой очаг на месте первичного внедрения туберкулезной палочки (закрытый процесс).

При закрытом процессе палочки туберкулеза не выделяются с мокротой, мочой и др.

Таким образом, даже при доброкачественном течении процесса организм не освобождается от возбудителей туберкулеза. Считают, что 80% людей инфицированы туберкулезными бактериями. Однако клинически они здоровы. Когда организм попадает в неблагоприятные условия, защитные функции его снижаются, бугорок подвергается некрозу, бактерии высвобождаются и вовлекают в процесс новые участки, наступает обострение, образуются каверны — открытый процесс. Иногда может быть генерализация процесса, которая приводит организм к гибели. Чаще туберкулез протекает в хронической форме (закрытый процесс). Большое значение при обострении имеют условия труда и быта.

Иммунитет . Человек обладает определенной резистентностью, т. е. при заражении не всегда возникает заболевание, а образуется инфекционный (нестерильный) иммунитет, который обусловливается комплексом защитных факторов: гуморальных, клеточных, а также резистентностью органов и тканей.

Профилактика . Ранняя диагностика, изоляция и т. д. Для специфической профилактики используется живая вакцина БЦЖ (BCG), полученная французскими учеными Кальметтом и Гереном. Эту вакцину вводят новорожденным однократно, внутрикожно в наружную поверхность плеча. Ревакцинацию проводят через 7-12 лет, а затем через каждые 5-6 лет до 30 лет.

Лечение . Антибактериальные препараты: стрептомицин, рифампицин, ПАСК, фтивазид и др.

Контрольные вопросы

1. Кем и когда был открыт возбудитель туберкулеза?

2. На какие типы делится туберкулезная палочка? Какой тип патогенен для человека?

3. Что обусловливает устойчивость микобактерий туберкулеза?

4. Каким методом окрашивают мазки для обнаружения туберкулезных микобактерий?

5. На какие формы диссоциируют микобактерий туберкулеза и какая форма является патогенной?

Микробиологическое исследование

Цель исследования: выявление возбудителя.

1. Мокрота (туберкулез легких и бронхов).

2. Экссудат из плевральной полости (туберкулез легких, плевры).

3. Асцитическая жидкость и кал (кишечная форма туберкулеза).

4. Моча (туберкулез почек).

5. Спинномозговая жидкость (туберкулезный менингит).

6. Кровь (генерализация процесса).

Способы сбора материала

Примечание. Баночки для сбора материала должны быть с завинчивающимися пробками. Посуду для сбора материала стерилизуют в автоклаве при 120° С в течение 20 мин или кипячением в течение 1 ч.

Ход исследования

1. На каких питательных средах выращивают микобактерии туберкулеза и какова длительность их роста?

2. Чем и для чего обрабатывают мокроту до посева ее на питательные среды?

3. Опишите рост туберкулезной палочки на плотной и жидкой питательных средах.

4. Какое животное является наиболее чувствительным к человеческому типу туберкулезной палочки?

Среда Левенштейна — Йенсена: солевой раствор; однозамещенный фосфат калия — 2,4 г; магния сульфат — 0,24 г; магния цитрат 10,6 г; аспарагин — 3,6 г; глицерин — 12 мл; картофельная мука — 5 г; вода дистиллированная — 600 мл.

Реактивы растворяют в указанной последовательности при слабом подогреве и стерилизуют 2 ч текучим паром. Солевая основа может быть приготовлена с запасом на 3-4 нед.

Яичная масса . 24-27 (в зависимости от величины) свежих диетических яиц моют проточной теплой водой, щеткой с мылом, погружают на 30 мин в 70% спирт, затем над спиртовкой в боксе разбивают стерильным пинцетом в колбу с бусами, хорошо размешивают и к 1 л яичной массы добавляют 600 мл солевого раствора. Смесь фильтруют через марлевый фильтр, добавляют 20 мл стерильного 2% раствора малахитового зеленого и разливают в пробирки по 5 мл. Свертывание производят при 85° С в течение 45 мин.

Среда Финна II . Солевая основа: магния сульфат — 0,5 г; натрия цитрат — 1 г; квасцы железоаммиачные — 0,05 г; калия фосфат однозамещенный — 20 г; аммония цитрат однозамещенный — 20 г; натрия глутамат однозамещенный — 5 г; глицерин — 20 мл; вода дистиллированная — до 1 л.

Ингредиенты растворяют в указанном порядке в теплой дистиллированной воде. Устанавливают рН 6,3-6,5. Стерилизуют при 1 атм 20 мин.

Яичная среда . 12 яиц моют щеткой с мылом, обрабатывают спиртом. Разбивают стерильным пинцетом и выливают в стерильную колбу с бусами, которую после добавления каждого яйца встряхивают до образования однородной массы. Добавляют 10 мл 20% водного раствора малахитового зеленого и 300 мл солевого раствора. Фильтруют через марлевый фильтр и свертывают при температуре 85° С в течение 30 мин.

Синтетическая среда Сотона . К 200 мл дистиллированной воды добавляют 4 г аспарагина, 0,5 г цитрата железа, 2 г лимонной кислоты, 0,5 г сульфата магния, 0,5 г основного фосфата калия, 60 г глицерина, 800 мл дистиллированной воды.

Микробиология микобактерий туберкулёза

В состав рода Mycobacterium семейства Mycobacteriaceae отдела Firmicutes включены неподвижные аэробные грамположительные палочковидные бактерии. Иногда они образуют нитевидные структуры, напоминающие мицелий грибов. Это и послужило основанием для их названия [греч. mykes, гриб и лат. bacterium, бактерия].

Поэтому микобактерии плохо воспринимают анилиновые красители и обычные способы окрашивания. Для окраски применяют интенсивные методы, обычно Циля-Нильсена. Растут медленно или очень медленно; сапрофитические виды растут несколько быстрее. Некоторые виды образуют каротиноидные недиффундирующие в среду пигменты.

Микобактерии широко распространены в окружающей среде и вызывают поражения, известные как микобактериозы Заболевания регистрируют у различных холоднокровных и теплокровных животных; наиболее характерны поражения кожи, лёгких и лимфатических узлов.

Классификация микобактерий

При классификации микобактерий учитывают патогенность для человека, способность к пигментообразованию, скорость роста и способность синтезировать никотиновую кислоту (ниацин).

По патогенности выделяют собственно патогенные (вызывающие конкретные заболевания), потенциально патогенные и сапрофитические микобактерии . Патогенными для человека свойствами обладают М. tuberculosis, M. leprae, M. bovis. Прочие виды, вызывающие поражения у человека, известны как атипичные микобактерии.

По скорости роста выделяют быстрорастущие (дают видимый рост на. 4-7-е сутки), медленнорастущие (рост наблюдают через 7-10 и более дней) и не растущие на искусственных средах (М. leprae) виды микобактерий .

По способности образовывать пигменты выделяют фотохромогенные (образуют пигмент на свету), скотохромогенные (образуют пигмент в темноте) и нефотохромогенные (не образуют пигмента) виды микобактерий .

Микробиология микобактерий туберкулёза

Микробиологическая диагностика 1. Основной метод – бактериологическое исследовани

txt fb2 ePub html

Шпаргалки на телефон - незаменимая вещь при сдаче экзаменов, подготовке к контрольным работам и т.д. Благодаря нашему сервису вы получаете возможность скачать на телефон шпаргалки по микробиологии и биотехнологии. Все шпаргалки представлены в популярных форматах fb2, txt, ePub , html, а также существует версия java шпаргалки в виде удобного приложения для мобильного телефона, которые можно скачать за символическую плату. Достаточно скачать шпаргалки по микробиологии и биотехнологии - и никакой экзамен вам не страшен!

Не нашли что искали?

Если вам нужен индивидуальный подбор или работа на заказа - воспользуйтесь этой формой.

Диагностика: 1) микроскопические исследование. Из мокроты делают два мазка. Один

Туберкулез

Возбудитель относится к роду Mycobakterium, вид M. tuberculesis.

Это тонкие палочки, слегка изогнутые, спор и капсул не образуют.

Туберкулезная палочка имеет особенности – в клеточной стенке содержится большое количество липидов (до 60 %). Большинство из них – миколовые кислоты, которые входят в каркас клеточной стенки, где находятся в виде свободных гликопептидов, входящих в состав корд-факторов. Корд-факторы обуславливают характер роста в виде жгутов.

Микобактерии туберкулеза окрашиваются по Цилю-Нильсену. Этот метод основан на кислотоустойчивости микобактерий.

В результате лечения противотуберкулезными препаратами возбудитель может утратить кислотоустойчивость.

Для микобактерий туберкулеза характерен выраженный полиморфизм. В их цитоплазматической мембране обнаруживаются характерные включения – зерна Муха. Микобактерии в организме человека могут переходить в L-формы.

На плотных питательных средах образуются характерные колонии: морщинистые, сухие, с неровными краями.

Возбудитель туберкулеза проникает в организм в составе мелкодисперсных аэрозолей. Возбудитель должен попасть в альвеолы, где они поглощаются резидентными макрофагами.

Из легких туберкулезная палочка попадает в регионарные лимфатические узлы, далее – в кровоток.

Путь заражения воздушно-капельный. Источник – больной человек, который в острый период выделяет с мокротой туберкулезные палочки.

Наиболее часто встречается туберкулез легких, но могут поражаться и кишечник, и опорно-двигательный аппарат, и мочеполовая система, и др. Выделяют два патогенетических варианта туберкулеза.

Через 2–3 недели формируется первичный туберкулезный комплекс(первичный аффект, лимфаденит, лимфангит).

Наиболее часто он самоизлечивается, подвергается фиброзу и кальцификации (очаг Гона). В других случаях развивается острый туберкулез.

Развитию вторичного туберкулеза способствуют неблагоприятные условия жизни, хронические заболевания, алкоголизм, и др.

Определение болезни, ее распространение в мире, роль социальных факторов в заболеваемости туберкулезом. Общая характеристика микобактерий, морфологические и биологические особенности рода Mycobacterium , к которому относится возбудитель туберкулеза Myсobacterium tuberculosis, открытый Кохом в 1888 году. Роль микобактерий в патологии человека. Распространение микобактерий в природе (почва, растения, организмы холоднокровных, теплокровных животных, слизистые оболочки человека). Род микобактерий включает более 40 видов, которые подразделяют на две основные группы: потенциально патогенные для человека (более 20 видов) и сапрофиты (около 20 видов).

Чаще всего заболевания людей (туберкулез и микобактериозы) вызывают следующие виды: M.tuberculosis, M.bovis, M.avium, M.microti, M.kansasii, M.africanum, M.ulcerans, M.xenopi, M.paratuberculosis, M.leprae, M.lapraemurium.

По характеру роста микобактерии делят на три группы: быстро растущие (колонии на питательной среде появляются ранее 7 дней), медленнорастущие (колонии появляются позднее 7 дней), и не растущие на питательных средах или требующие особых условий роста (M.leprae, M.lepraemarium). Большинство указанных выше возбудителей заболеваний человека относятся к категории медленно растущих микобактерий (кроме M.paratuberculosis, которая относится к группе быстрорастущих).

По признаку пигментообразования микобактерии подразделяют на фотохромогенные (колонии приобретают лимонно-желтую окраску при культивировании на свету в активной фазе роста); скотохромогенные - пигмент оранжево-желтого цвета образуется при инкубации в темноте; нехромогенные - колонии не имеют пигмента или имеют светло-желтую окраску (вне влияния света).

Виды бактерий дифференцируются по скорости роста, пигментообразованию, влиянию света на него, по способности синтезировать ниацин (никотиновую кислоту) и по наличию у них различных ферментов.

Быстро растущие микобактерии широко распространены в природе, большинство из них - сапрофиты. Однако четыре вида, кроме M.paratuberculosis, M.fortuitum, M.vaccae, M.chelonei - также могут вызывать заболевания у людей и животных, характеризующиеся значительным разнообразием клинической картины. Макроскопические поражения могут быть сходными с картиной туберкулеза, но гистологические исследования ткани выявляют изменения, отличающиеся от таковых при туберкулезе.

Условно можно выделить три основных типа микобактериозов, зависящих как от вида быстро и медленнорастущих микобактерий, так и от организма.

1 тип - характеризуется генерализованной инфекцией с развитием видимых невооруженным глазом патологических изменений в разных частях тела;

2 тип - характеризуется наличием макро- и микроскопических поражений, локализованных в определенных частях тела;

3 тип - заболевание протекает без развития видимых поражений. В лимфатических узлах обнаруживаются внеклеточно и внутриклеточно расположенные микобактерии.

В нашей стране микобактериозы наблюдаются редко, в то время как в африканских и некоторых других странах на них приходится свыше 30% всех туберкулезных заболеваний.

Характеристика свойств возбудителя туберкулеза. Прямые или слегка изогнутые грамположительные палочки диаметром 0,2-0,6 мкм и длиной 1,0-4,0 мкм, спор и капсул не образуют, неподвижны, аэробы, оптимум рН=6,4-7,0. Кроме палочковидных могут быть нитевидные и зернистые формы (зерна Муха). В результате L-трансформации часто образуются мелкие зернистые (фильтрующиеся) формы. Бактерии характеризуются высоким содержанием липидов (до 40% сухого веса клеток).

В составе липидов три фракции:

фосфатидная, растворимая в эфире;

жировая, растворимая в эфире и ацетоне;

восковая, растворимая в эфире и хлороформе.

Высокое содержание липидов определяет многие важные биологические свойства возбудителя: устойчивость во внешней среде; устойчивость к кислотам, щелочам, спирту; устойчивость к красителям (способ окраски по Циль-Нильсену); устойчивость к дезинфектантам; особенности роста на плотных и жидких средах, обусловленные гидрофобностью. Липиды - факторы патогенности возбудителя туберкулеза. Корд-фактор. Особенности роста вирулентных туберкулезных бактерий в микрокультуpax (рост - в виде косы, каната), обусловленные наличием корд-фактора. Цитохимические методы определения вирулентности. Вирулентность туберкулезных бактерий для животных.

Дифференциация видов туберкулезных бактерий по патогенности для животных (кролики, морские свинки).

Питательные среды, применяемые для культивирования туберкулезных бактерий (картофельные, глицериновые, яичные, полусинтетические и синтетические). Соблюдение необходимых условий (доступ кислорода, достаточная влажность, кислая рН и др.).

Туберкулез у человека. Источники инфекции - больной человек и крупный рогатый скот.

Способы заражения - воздушно-капельный, воздушно-пылевой, алиментарный (от крупного рогатого скота), возможность проникновения возбудителя через любую поврежденную ткань. Основные формы туберкулеза.

Патогенез туберкулеза. Формирование первичного очага. Инфекционная гранулема, ее структура. Естественная резистентность к туберкулезу. Судьба первичного комплекса, формирование приобретенного иммунитета, феномен Коха. Сущность приобретенного иммунитета, его опосредованность системой Т-лимфоцитов. Туберкулиновая проба, выявление специфической туберкулиновой аллергии (гиперчувствительности замедленного действия).

Туберкулопротеины индуцируют образование гиперчувствительности немедленного типа. Варианты туберкулина:

1)АТ - старый туберкулин Коха (10000 ТЕ/мл). Его недостатки - нестандартность, наличие посторонних компонентов, кроме самого туберкулина.

2)PPD-S - Purifed protein derivate Seibert. Международная единица - 0,000028 мг сухого порошка PPD-S. Для определения туберкулиновой аллергии доза 0,0001 мг PPD-S.

3) PPD-L -Purifed protein derivate Linnikova, дозировки: 5ТЕ в 0,1 мл; 100 ТЕ в 0,1 мл.

Внешнее проявление туберкулиновых проб Пирке и Манту (папула диаметром 5 мм и более - положительная реакция). Их диагностическое значение. Сенситины - аллергены для выявления чувствительности к другим микобактериям.

Особенности течения туберкулеза - чередование периодов ремиссия и рецидивов. Значение L-форм (ультра-малых форм) возбудителя в инфекционном процессе. Незавершенность фагоцитоза.

Методы микробиологической диагностики туберкулеза.

Бактериоскопический . Его особенности, недостатки (малое количественное содержание возбудителя, непостоянство его выделения, изменение формы). Необходимость использования методов обогащения. Применение люминесцентной микроскопии, фазово-контрастной микроскопии.

Бактериологический метод - основной способ диагностики и контроля эффективности лечения. Обязательная проверка чувствительности возбудителя к химиопрепаратам. Соблюдение условий: высокое качество питательной среды, кислая рН, достаточный доступ О2, достаточная посевная доза, возможность выделения L-форм возбудителя, необходимая продолжительность исследования. Для идентификации различных видов микобактерий учитывается скорость роста, пигментообразование и влияние на него фотоактивации, способность синтезировать ниацин, изучение спектра ферментов.

Для выделения L-форм применяют специальные полужидкие среды, рост в них в виде крупинок с облачком помутнения, для микроскопии лучше пользоваться фазово-контрастным микроскопом и непрямым методом иммунофлуоресценции.

Использование метода микрокультур для выделения возбудителя.

Биологический метод. Один из наиболее чувствительных - заражение морской свинки. Может быть использован и для выделения L-форм возбудителя (пассаж на морских свинках).

Использование аллергических проб Пирке и Манту.

Серологический метод, Использование РСК, РПГА, реакция агрегат-гемагглютинации (для обнаружения ЦИК). Использование ИФМ для обнаружения антител к белковым антигенам М.tuberculosis.

Использование ДНК-зонда. Зонды содержат последовательности, комплементарные повторяющимся 10-16 раз последовательностям ДНК М.tuberculosis.

Лечение туберкулеза. Использование химиопрепаратов и антибиотиков 1 ряда: производные гидразида изоникотиновой кислоты (тубазид фтивазид, салюзид и др.), препаратов группы стрептомицина; производных парааминосалициловой кислоты; 2 ряда: циклосерин, канамицин, виомицин, рифампицин и др. новейших химиопрепаратов и антибиотиков.

Борьба с туберкулезом. Система противотуберкулезной службы.

Специфическая профилактика туберкулеза. Вакцина БЦЖ (Bacille Calmette, Guerin). История ее создания, эффективность использования.

Обязательность прививок против туберкулеза во всем мире.

Вакцинация производится в первые 5-7 дней жизни. Однократно внутрикожно вводится 0,05 мг сухой бактериальной массы в объеме 0,01 мл.

Ревакцинации в возрасте 7-12-17-20-22-27-30 лет. Перед ревакцинацией ставится проба Манту (5 ТЕ/0,1 мл). Ревакцинация проводится только в случае отрицательной пробы Манту.

Лекция 13.

Тема: МИКРОБИОЛОГИЯ ДИФТЕРИИ.

Определение болезни. История изучения болезни и ее возбудителя. Характеристика рода Corynebacterium , к которому относится возбудитель дифтерии - Corynebacterium diphtheriaе.

Морфологические особенности возбудителя - прямая или изогнутая грамположительная палочка диаметром 0,3-0,8 мкм и длиной 1,0-8,0 мкм; спор и капсул не образует, жгутиков не имеет. Содержание Г+Ц= 60 молей%. Тинкториальные особенности, метахромазия, наличие зерен волютина, их выявление.

Кулътуральные и биохимические свойства возбудителя - аэробы и факультативные анаэробы, ферментируют с образованием кислоты глюкозу и мальтозу, как правило, не ферментируют сахарозу, не образуют индола, не имеют уреазы и желатиназы, но имеют цистиназу.

Питательные среды - сывороточные, кровяные, с добавлением теллурита калия.

Три биовара возбудителя дифтерии - gravis, mitis, intermedius, их отличительные кулътуральные и биохимические признаки.

Признаки, отличающие возбудителя дифтерии от других коринебактерий, являющихся представителями микрофлоры кожи и слизистых оболочек человека.

Антигенное строение возбудителя дифтерии (одиннадцать основных сероваров).

Системы фаготипирования дифтерийных бактерий (румынская, отечественная Крыловой). Источник инфекции - только человек (больной или бактерионоситель), очень редко - крупный рогатый скот.

Способы заражения - воздушно-капельный, воздушно-пылевой, прямой и непрямой контакты. Локализация дифтерии (нос, зев, гортань, глаза, ухо, половые органы, кожа, смешанные формы).

Факторы патогенности: факторы адгезии и колонизации; нейраминидаза, протеаза, гиалуронидаза; токсический гликолипид (трегалозодикоринемиколат).

Главный фактор патогенности - экзотоксин. Способы выявления экзотоксина - биопробы на морской свинке (подкожное или внутрикожное заражение); заражение куриных эмбрионов (гибель эмбрионов); заражение культур клеток (цитопатический эффект); использование РПГА, иммуноферментного метода и ДНК-зонда.

Однако наиболее простым является определение токсигенности возбудителя дифтерии методом встречной диффузии с антитоксином в геле. Сущность метода.

Токсигенность дифтерийных бактерий является следствием их лизогенизации tox-фагами. Одноцистронный оперон кодирует синтез протоксина с мол.весом 61 кДа, который под влиянием бактериальной протеазы разрезается на два фрагмента ("разрезанный" токсин) А и В. Фрагмент В (39 кДа) выполняет акцепторную роль и обеспечивает формирование внутримембранного канала.

Фрагмент А (21 кДа) - собственно токсин со свойствами фермента. Он обеспечивает перенос аденозин-дифосфатрибозы из состава NАД на фактор элонгации EF2, в результате чего фактор элонгации инактивируется и наступает остановка работы рибосомы на стадии транслокации.

Проблема превращения нетоксигенных дифтерийных бактерий в токсигенные у бактерионосителей.

Патогенез дифтерии; адгезия и колонизация, поражение стенок кровеносных сосудов токсином, воспаление, выпотевание жидкости, выход фибриногена, образование характерной пленки, опасность отеке зева (вторичный круп).

Общее действие токсина - поражение сердечно-сосудистой и симпатико-адреналовой систем и периферических нервов.

Иммунитет при дифтерии, его природа.

Реакция Шика, ее значение и применение.

Использование РПГА для обнаружения и титрования антитоксина. Превращение токсина в анатоксин. Токсин-антитоксин-анатоксин, их природа.

Современная классификация возбудителей дифтерии с учетом их токсигенных и нетоксигенных вариантов. Критерии, используемые для этой классификации (отношение к фагам, корициногенность, серологические, культуральные, биохимические свойства и ДНК-ДНК-гибрадизация).

Микробиологическая диагностика дифтерии.

Необходимость выделения чистой культуры возбудителя, изучение его свойств и определение токсигенности.

Проблема дифтерийного бактерионосительства. Специфическая профилактика дифтерии. Препараты, применяемые для создания коллективного иммунитета против дифтерии (АКДС, сроки вакцинации и ревакцинации, АДС - М - анатоксин, АД - анатоксин, вакцина "Кодивак").

Лекция 14.

Тема: РИККЕТСИИ И ЗАБОЛЕВАНИЯ, ВЫЗЫВАЕМЫЕ ИМИ (РИККЕТСИОЗЫ).

Риккетсии - грамотрицательные полиморфные бактерии, патогенные для человека, животных и кровососущих членистоногих.

История открытия риккетсий (возбудителя сыпного тифа). Дискуссия о месте риккетсий в системе микроорганизмов, обусловленная тем, что риккетсии не способны расти на питательных средах (кроме возбудителя волынской лихорадки).

Общая характеристика свойств риккетсий, морфология, структура (наличие клеточной стенки, ядерного аппарата, собственных систем синтеза белка и генерации энергии определяет принадлежность риккетсий к прокариотам, а их особенности обосновывают необходимость выделения в самостоятельное семейство Rickettsiaceae.

Особенность онтогенеза риккетсий: две стадии его - вегетативная и покоящаяся.

Методы культивирования риккетсий: заражения животных (морские свинки, белые мыши), куриных эмбрионов, культур клеток (бляшкообразование).

Принципы классификации риккетсий и риккетсиозов. Род Rickettsia включает 10 видов риккетсий, вызывающих три группы риккетсиозов:

1. Группа сыпного тифа: сыпной тиф, крысиный сыпной тиф, канадский риккетсиоз, их возбудители и их особенности (сумма Г+Ц=30 мол.%, размножение в цитоплазме эукариотных клеток), переносчики, источники.

2. Группа клещевой пятнистой лихорадки: пятнистая лихорадка Скалистых гор, марсельская лихорадка, северо-австралийский клещевой сыпной тиф, клещевой сыпной тиф Северной Азии, везикулезный риккетсиоз, пятнистая лихорадка, возбудители и их особенности (сумма Г+Ц=32-33 мол.%, размножение в ядре и цитоплазме эукариотных клеток). Переносчики и резервуар среди животных.

3. Группа цуцугамуши (группа тифа джунглей). Возбудитель -R.tsutsugamushi, его особенности (размножение в цитоплазме эукариотных клеток), переносчики, резервуары среди животных.

4. Группа пневмориккетсиоза (Ку-лихорадка). Возбудитель - Coxiella burnettii, его особенности (сумма Г+Ц=43 мол.%, размножение в фаголизосомах эукариотных клеток;. Особенности эпидемиологии. Источники инфекции.

5. Группа пароксизмалъного риккетсиоза (волынская, или траншейная пятнистая лихорадка). Возбудитель - Rochalimaea quintana, его особенности (размножается внеклеточно, на поверхности эукариотных клеток, растет на некоторых средах, сумма Г+Ц=39 мол.%), особенности эпидемиологии.

На территории нашей страны регистрируют заболевания сыпным тифом, существуют эндемические очаги сибирского риккетсиоза, марсельской лихорадки, лихорадки цуцугамуши, Ку-лихорадки, везикулезного риккетсиоза и крысиного риккетсиоза.

Сыпной тиф. Определение болезни, история изучения возбудителя и способов заражения сыпным тифом. Гипотезы Г.Н.Минха и О.О.Мочутковского. Открытие Ш.Николлем способа заражения сыпным тифом и значение этого открытия для борьбы с ним. Механизм заражения: риккетсии размножаются в эпителиальных клетках кишечника вшей, вызывают их разрушение и, выделяясь с экскрементами во время укуса, проникают в кровь.

Особенности патогенеза - поражение мелких кровеносных сосудов (тромбопериваскулиты в области разветвлений артериол), нарушение кровоснабжения, (особенно мозговой ткани, сердечной мышцы, надпочечников), сильная интоксикация.

Факторы патогенности: липополисахарид (эндотоксин); белок I, содержащийся в наружном капсулоподобном слое, обладает цитотоксическим действием. Он же является основным видовым антигеном возбудителя сыпного тифа и обладает протективными свойствами.

Источник инфекции - только человек (в США имеются природные очаги, в которых источником являются белки-летяги).

Иммунитет при сыпном тифе длительный, нестерильный. Риккетсии у переболевших персистируют десятилетия (возможно, пожизненно) внутриклеточно. Болезнь Брилля (повторный сыпной тиф) - рецидив ранее перенесенного сыпного тифа.

Методы микробиологической диагностики сыпного тифа и других риккетсиозов.

В связи с тем, что риккетсии не растут на питательных средах, основным методом диагностики риккетсиозов является использование иммунологических реакций. С этой целью применяют следующие серологические реакции с использованием риккетсиозных антигенов: реакция агглютинации, РСК, РПГА, реакция непрямого гемолиза, реакция иммунофлуоресценции, иммуноферментный метод в модификации "захват" антител класса IgM. Специфичность реакции значительно повышается при использовании моноклональных антител. Для диагностики сыпного тифа и Ку-лихорадки предложены внутрикожные аллергические пробы с соответствующими аллергенами.

Кроме того, для диагностики риккетсиозов могут быть использованы биологические методы (заражение животных, куриных эмбрионов), заражение культур клеток (образование бляшек).

Для специфической профилактики сыпного тифа предложены живая сыпнотифозная вакцина (ЖСВ-Е), химическая сыпнотифозная вакцина (ХСВ), комбинированная вакцина (ЖКСВ-Е). Для профилактики Ку-лихорадки - живая вакцина из аттенуированного штамма М-44.

1.Медицинская микробиология. Предмет, задачи, методы, связь с другими науками. Значение медицинской микробиологии в практической деятельности врача.
3. Микроорганизмы и их положение в системе живого мира. Номенклатура бактерий. Принципы классификации.
6. Рост и размножение бактерий. Фазы размножения.
7.Питание бактерий. Типы и механизмы питания бактерий. Аутотрофы и гетеротрофы. Факторы роста. Прототрофы и ауксотрофы.
8.Питательные среды. Искусственные питательные среды: простые, сложные, общего назначения, элективные, дифференциально-диагностические.
9. Бактериологический метод изучения микроорганизмов. Принципы и методы выделения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий. Характер роста микроорганизмов на жидких и плотных питательных средах.
13. Спирохеты, их морфология и биологические свойства. Патогенные для человека виды.
14. Риккетсии, их морфология и биологические свойства. Роль риккетсий в инфекционной патологии.
15. Морфология и ультраструктура микоплазм. Виды, патогенные для человека.
16. Хламидии, морфология и другие биологические свойства. Роль в патологии.
17. Грибы, их морфология и особенности биологии. Принципы систематики. Заболевания, вызываемые грибами у человека.
20. Взаимодействие вируса с клеткой. Фазы жизненного цикла. Понятие о персистенции вирусов и персистентных инфекциях.
21. Принципы и методы лабораторной диагностики вирусных инфекций. Методы культивирования вирусов.
24. Строение генома бактерий. Подвижные генетические элементы, их роль в эволюции бактерий. Понятие о генотипе и фенотипе. Виды изменчивости: фенотипическая и генотипическая.
25. Плазмиды бактерий, их функции и свойства. Использование плазмид в генной инженерии.
26. Генетические рекомбинации: трансформация, трансдукция, конъюгация.
27. Генная инженерия. Использование методов генной инженерии для получения диагностических, профилактических и лечебных препаратов.
28.Распространение микробов в природе. Микрофлора почвы, воды, воздуха, методы ее изучения. Характеристика санитарно-показательных микроорганизмов.
29. Нормальная микрофлора тела человека, ее роль в физиологических процессах и патологии. Понятие о дисбактериозе. Препараты для восстановления нормальной микрофлоры: эубиотики (пробиотики).
31. Формы проявления инфекции. Персистенция бактерий и вирусов. Понятие о рецидиве, реинфекции, суперинфекции.
32. Динамика развития инфекционного процесса, его периоды.
33. Роль микроорганизма в инфекционном процессе. Патогенность и вирулентность. Единицы измерения вирулентности. Понятие о факторах патогенности.
34. Классификация факторов патогенности по о.В. Бухарину. Характеристика факторов патогенности.
35. Понятие об иммунитете. Виды иммунитета.
36. Неспецифические защитные факторы организма против инфекции. Роль и.И. Мечникова в формировании клеточной теории иммунитета.
37. Антигены: определение, основные свойства. Антигены бактериальной клетки. Практическое использование антигенов бактерий.
38. Структура и функции иммунной системы. Кооперация иммунокомпетентных клеток. Формы иммунного ответа.
39. Иммуноглобулины, их молекулярная структура и свойства. Классы иммуноглобулинов. Первичный и вторичный иммунный ответ. :
40. Классификация гиперчувствительности по Джейлу и Кумбсу. Стадии аллергической реакции.
41. Гиперчувствительность немедленного типа. Механизмы возникновения, клиническая значимость.
42. Анафилактический шок и сывороточная болезнь. Причины возникновения. Механизм. Их предупреждение.
43. Гиперчувствительность замедленного типа. Кожно-аллергические пробы и их использование в диагностике некоторых инфекционных заболеваний.
44. Особенности противовирусного, противогрибкового, противоопухолевого, трансплантационного иммунитета.
45. Понятие о клинической иммунологии. Иммунный статус человека и факторы, влияющие на него. Оценка иммунного статуса: основные показатели и методы их определения.
46. Первичные и вторичные иммунодефициты.
47. Взаимодействие антигена с антителом in vitro. Теория сетевых структур.
48. Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки. Применение.
49. Реакция Кумбса. Механизм. Компоненты. Применение.
50. Реакция пассивной гемагглютинации. Механизм. Компоненты. Применение.
51. Реакция торможения гемагглютинации. Механизм. Компоненты. Применение.
53. Реакция связывания комплемента. Механизм. Компоненты. Применение.
54. Реакция нейтрализации токсина антитоксином, нейтрализации вирусов в культуре клеток и в организме лабораторных животных. Механизм. Компоненты. Способы постановки. Применение.
55. Реакция иммунофлюоресценции. Механизм. Компоненты. Применение.
56. Иммуноферментный анализ. Иммуноблотинг. Механизмы. Компоненты. Применение.
57. Вакцины. Определение. Современная классификация вакцин. Требования, предъявляемые к вакцинным препаратам.
59. Вакцинопрофилактика. Вакцины из убитых бактерий и вирусов. Принципы приготовления. Примеры убитых вакцин. Ассоциированные вакцины. Преимущества и недостатки убитых вакцин.
60. Молекулярные вакцины: анатоксины. Получение. Использование анатоксинов для профилактики инфекционных заболеваний. Примеры вакцин.
61. Генно-инженерные вакцины. Получение. Применение. Преимущества и недостатки.
62. Вакцинотерапия. Понятие о лечебных вакцинах. Получение. Применение. Механизм действия.
63. Диагностические антигенные препараты: диагностикумы, аллергены, токсины. Получение. Применение.
64. Сыворотки. Определение. Современная классификация сывороток. Требования, предъявляемые к сывороточным препаратам.
65. Антительные препараты – сыворотки, применяемые для лечения и профилактики инфекционных заболеваний. Способы получения. Осложнения при применении и их предупреждение.
66. Антительные препараты – сыворотки, применяемые для диагностики инфекционных заболеваний. Способы получения. Применение.
67. Понятие об иммуномодуляторах. Принцип действия. Применение.
68. Интерфероны. Природа, способы получения. Применение. № 99 Интерфероны. Природа, способы получения. Применение.
69. Химиотерапевтические препараты. Понятие о химиотерапевтическом индексе. Основные группы химиотерапевтических препаратов, механизм их антибактериального действия.
71. Лекарственная устойчивость микроорганизмов и механизм ее возникновения. Понятие о госпитальных штаммах микроорганизмов. Пути преодоления лекарственной устойчивости.
72. Методы микробиологической диагностики инфекционных болезней.
73. Возбудители брюшного тифа и паратифов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
74. Возбудители эшерихиозов. Таксономия. Характеристика. Роль кишечной палочки в норме и патологии. Микробиологическая диагностика эшерихиозов.
75. Возбудители шигеллеза. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
76. Возбудители сальмонеллезов. Таксономия. Характеристика. Микробиологический диагноз сальмонеллезов. Лечение.
77. Возбудители холеры. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
78.Стафилококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых стафилококками. Специфическая профилактика и лечение.
79. Стрептококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций. Лечение.
80. Менингококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций. Лечение.
81. Гонококки. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика гонореи. Лечение.
82. Возбудитель туляремии. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
83. Возбудитель сибирской язвы. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
84. Возбудитель бруцеллеза. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
85. Возбудитель чумы. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
86. Возбудители анаэробной газовой инфекции. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
87. Возбудители ботулизма. Таксономия и характеристика Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
88. Возбудитель столбняка. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика и лечение.
89. Неспорообразующие анаэробы. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика и лечение.
90. Возбудитель дифтерии. Таксономия и характеристика. Условно – патогенные коринебактерии. Микробиологическая диагностика. Выявления анатоксического иммунитета. Специфическая профилактика и лечение.
91. Возбудители коклюша и паракоклюша. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
92. Возбудители туберкулеза. Таксономия и характеристика. Условно – патогенные микобактерии. Микробиологическая диагностика туберкулеза.
93. Актиномицеты. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.
95. Возбудитель хламидиозов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.
96.Возбудитель сифилиса. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.
97. Возбудитель лептоспирозов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика. Лечение.
98. Возбудитель боррелиозов. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика.
99. Клиническая микробиология, ее задачи. Вби, особенности причины возникновления.Роль условно – патогенных микроорганизмов в возникновении внутрибольничных инфекций.
100. Классификация грибов. Характеристика. Роль в патологии. Лабораторная диагностика. Лечение.
101. Классификация микозов. Поверхностные и глубокие микозы. Дрожжеподобные грибы рода кандида. Роль в патологии человека.
102. Возбудитель гриппа. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.
103. Возбудитель полиомиелита. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
104. Возбудители гепатитов а и е. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
105. Возбудитель клещевого энцефалита. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
106. Возбудитель бешенства. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
107. Возбудитель краснухи. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
108. Вирус кори. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
Болезнь вызывается 3 видами микобактерий: Mycobacterium tuberculosis - человеческий вид, Mycobacterium bovis - бычий вид, Mycobacterium africanum - промежуточный вид.
Таксономия. отдел Firmicutes, род Mycobacterium. Родовой признак - кислото, спирто- и щелочеустойчивость.
Морфология, тинкториальные и культуральные свойства . Выраженный полиморфизм. Они имеют форму длинных, тонких (М.tuberculosis) или коротких, толстых (M.bovis), прямых или слегка изогнутых палочек с гомогенной или зернистой цитоплазмой; грамположительны, неподвижны, спор не образуют, имеют микрокапсулу. Для их выявления применяют окраску по Цилю-Нильсену. Микобактерии могут образовывать различные морфовары (L-формы бактерий), которые длительно персистируют в организме и индуцируют противотуберкулезный иммунитет.
Возбудители туберкулеза характеризуются медленным ростом, требовательны к питательным средам. М. tuberculosis относятся к аэробам, глицеринзависимы. На жидких питательных средах дают рост в виде сухой пленки кремового цвета. При внутриклеточном развитии, а также при росте на жидких средах выявляется характерный корд-фактор, благодаря которому микобактерии растут в виде «жгутов». На плотных средах рост в виде кремового, сухого чешуйчатого налета с неровными краями (R-формы). По мере роста колонии приобретают бородавчатый вид. Под влиянием антибактериальных средств возбудители изменяют культуральные свойства, образуя гладкие колонии (S-формы). M . bovis -растут на средах медленнее, чем M.tuberculosis, пируватзависимы; на плотных питательных средах образуют мелкие шаровидные, серовато-белые колонии (S-формы).
Ферментная активность. Высокая каталазная и пероксидазная активность. Каталаза термолабильна. М.tuberculosis в большом количестве синтезирует ниацин (никотиновая кислота), который накапливается в культуральной среде и определяется в пробе Конно.
Химический состав: Основными химическими компонентами микобактерии являются белки, углеводы и липиды. Липиды (фосфатиды, корд-фактор, туберкулостеариновая кислота) - обусловливают устойчивость к кислотам, спиртам и щелочам, препятствуют фагоцитозу, нарушают проницаемость лизосом, вызывают развитие специфических гранулем, разрушают митохондрии клеток. Микобактерии индуцируют развитие реакции гиперчувствительности IV типа (туберкулин).
Факторы патогенности: о сновные патогенные свойства обусловлены прямым или иммунологически опосредованным действием липидов и липидсодержащих структур.
Антигенная структура: В ходе заболевания к антигенам образуются антипротеиновые, антифосфатидные и антиполисахаридные антитела, свидетельствующие об активности процесса.
Резистентность. Наличие липидов - устойчивы к действию неблагоприятных факторов. Высушивание мало влияет. Погибают при кипячении.
Эпидемиология . Основной источник инфекции - человек, больной туберкулезом органов дыхания, выделяющий микробы в окружающую среду с мокротой. Основные пути передачи инфекции - воздушно-капельный и воздушно-пылевой.
Патогенез и клиника. Возникновению заболевания способствуют различные иммунодефициты. Инкубационный период составляет от 3-8 нед. до 1 года и более. В развитии болезни выделяют первичный, диссеминированный и вторичный туберкулез, который является результатом эндогенной реактивации старых очагов. В зоне проникновения микобактерий возникает первичный туберкулезный комплекс, состоящий из воспалительного очага, пораженных регионарных лимфатических узлов и измененных лимфатических сосудов между ними. Диссеминация микробов может происходить бронхо-, лимфо- и гематогенно. В основе специфического воспаления при туберкулезе лежит реакция гиперчувствительности IV типа, что препятствует распространению микробов по организму.
Различают 3 клинические формы: первичная туберкулезная интоксикация у детей и подростков, туберкулез органов дыхания, туберкулез других органов и систем. Основными симптомами легочного туберкулеза являются субфебрильная температура тела, кашель с мокротой, кровохарканье, одышка.
Иммунитет. Противотуберкулезный иммунитет нестерильный инфекционный, обусловлен наличием в организме L-форм микобактерий.
Микробиологическая диагностика. Диагностику проводят с помощью бактериоскопии, бактериологического исследования и постановки биологической пробы. Все методы направлены на обнаружение микобактерий в патологическом материале: мокроте, промывных водах бронхов, плевральной и церебральной жидкостях, кусочках тканей из органов.
К обязательным методам обследования относится бактериоскопическое, бактериологическое исследование, биологическая проба, туберкулинодиагностика, основанная на определении повышенной чувствительности организма к туберкулину. Чаще для выявления инфицирования и аллергических реакций ставят внутрикожную пробу Манту с очищенным туберкулином в стандартном разведении. Для экспресс-диагностики туберкулеза применяют РИФ(реакция иммунофлюоресенции) и ПЦР(полимеразная цепная реакция). Для массового обследования населения, раннего выявления активных форм туберкулеза можно использовать ИФА(иммуноферментный анализ), направленный на обнаружение специфических антител.
Лечение. По степени эффективности противотуберкулезные препараты делят на группы: группа А - изониазид, рифампицин; группа В - пиразинамид, стрептомицин, флоримицин; группа С – ПАСК, тиоацетозон. При наличии сопутствующей микрофлоры и множественной лекарственной устойчивости микобактерий применяют фторхинолоны и альдозон.
Профилактика. Специфическую профилактику проводят путем введения живой вакцины - BCG(БЦЖ), внутрикожно на 2-5-й день после рождения ребенка. Проводят последующие ревакцинации. Предварительно ставят пробу Манту для выявления туберкулиннегативных лиц, подлежащих ревакцинации.
Условно-патогенные микобактерии: семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium. Сходны по биологич. свойствам, но устойчивы к противотуберкулезным препаратам.
1 группа: медленнорастущие фотохромогенные M.kansassi, M.marinum – поражения кожи, лимфадениты, инфекции мочеполового тракта.
2 группа: медленнорастущие скотохромогенные: M.scrofulaceum, M.gordonae.
3 группа: медленнорастущие нехромогенные: M.avium, M.gastri.
4 группа: быстрорастущие ското-,фотохромогенные: M.fortuitum, M.chelonei.

Категории

Выбор редакции

Особенности состава клеточной стенки туберкулезных бактерий. Факторы патогенности туберкулезной палочки. L-формы микобактерий туберкулеза

Атипичные микобактерии

Микробиология Возбудитель туберкулза

Культуральные свойства возбудителя туберкулеза

Устойчивость возбудителя туберкулеза во внешней среде

Как избежать контакта с микобактериями

Патогенез

Морфология и культуральные свойства

Также в разделе

Бактерии, вызывающие туберкулез

Генетика и изменчивость микобактерий

Антигены

Диагностика МБТ

Лечение и профилактика

Лечение и профилактика

Типы микобактериоза

Состав микобактерии

Патогенность микобактерий туберкулеза

Размножение микобактерий туберкулеза

Биохимические особенности

Формы поведения

Диагностика МБТ

Изменчивость микобактерий

Виды лекарственной устойчивости

Геном микобактерий туберкулеза

Химический состав микобактерий туберкулеза

40. Туберкулез

Патогенные микобактерии — Ф. К. Черкес

Глава 33. Возбудители туберкулеза

Контрольные вопросы

Микробиологическое исследование

Микробиология микобактерий туберкулёза

Классификация микобактерий

Микробиология микобактерий туберкулёза

Не нашли что искали?

Туберкулез

Поиск

Подписка

Популярные записи

Последние записи